狂犬病毒RT-PCR诊断方法的建立及初步研究

来源 :四川省畜牧兽医学会2012年学术年会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wyslymx2
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  目的:建立RT-PCR方法,用于检测可疑犬只唾液中的狂犬病毒,为狂犬病的快速诊断提供技术支持。方法:根据GenBank中登录的狂犬病毒(RV)N基因序列,设计合成一对特异性引物,以RV弱毒株Flury-HEP为模板,建立了一种快速检测RV的RT-PCR检测方法,并应用于RV诊断。结果:以此对引物进行PCR扩增能得到与理论设计值大小一致的342bp的特异性条带,犬瘟热病毒(CPV)、犬细小病毒(CPV)、犬冠状病毒(CCV)、腺病毒(CAV)扩增结果均为阴性;最低可检出约1.3pg的病毒核酸;重复性试验结果表明,其检测重复性好,对77份犬唾液标本及64份大熊猫粪便样品用所建立的RT-PCR方法检测,检测到1例大熊猫样品为阳性。结论:建立的RT-PCR检测法,特异性强,敏感度高,重复性和稳定性均好,结果可靠,值得推广应用。
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