【摘 要】
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将本实验室分离保存的NA-1株鹅副黏病毒(GPMV)经SPF鸡胚增殖,收集鸡胚尿囊液进行病毒纯化,提取病毒基因组RNA.参考GenBank已收录的ZJ1株GPMV基因组序列,设计了8对特异性引物,RT-PCR法分别特异性的扩增出病毒各基因片段,并将各目的基因片段回收纯化,克隆PGEM-T载体,转化大肠杆菌DH5α,小提质粒选取阳性克隆酶切鉴定并进行序列测定,对测定结果进行拼接得到全长cDNA序列(
【机 构】
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吉林大学畜牧兽医学院,吉林长春,130062
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将本实验室分离保存的NA-1株鹅副黏病毒(GPMV)经SPF鸡胚增殖,收集鸡胚尿囊液进行病毒纯化,提取病毒基因组RNA.参考GenBank已收录的ZJ1株GPMV基因组序列,设计了8对特异性引物,RT-PCR法分别特异性的扩增出病毒各基因片段,并将各目的基因片段回收纯化,克隆PGEM-T载体,转化大肠杆菌DH5α,小提质粒选取阳性克隆酶切鉴定并进行序列测定,对测定结果进行拼接得到全长cDNA序列(GenBank登录号:DQ659677).NA-1株GPMV核苷酸比新城疫病毒(NDV)核苷酸多6个碱基,位于1 644～1 645nt之间,符合NDV核苷酸"六碱基原则".序列分析结果表明,GPMVNA-1株与各地代表株核苷酸同源性81.2％～91.3％.同时根据各毒株F基因开放阅读框前389个核苷酸序列绘制出系统发育进化树,结果表明NA-1株与SF02和QY97病毒株同属于基因Ⅶ型,不同于基因Ⅸ型NDV的国家标准株F48E9和基因Ⅱ型的Lasota传统弱毒株.
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本试验测定了藏鸡(T)、农大黑鸡(N)、藏鸡×农大黑鸡(TN)、矮小型隐性白羽鸡(D)和藏鸡×矮小型隐性白羽鸡(TD)5组鸡早期体重生长数据,用Brody、Logistic、Gompertz、von Bertalanffy、Richards和多项式6种模型拟合其生长曲线.通过拟合优度(R)和残差平方和(E)的比较,发现Gompertz和Richards模型拟合效果较佳.进一步比较不同组间Gompe
本试验比较了不同杂交品种宫廷黄鸡肌肉中游离脂肪酸的组分.研究结果最终表明,综合考虑组合品种和性别因素,从肌肉游离脂肪酸含量的角度比较,宫廷黄鸡母鸡肌肉的营养价值和风味口感要优于公鸡肌肉,北京油鸡×石歧黄鸡组合的肌肉品质要优于北京油鸡×北京油鸡组合、北京油鸡×矮脚黄鸡组合和北京油鸡×隐性白鸡组合.
免疫原基因的密码子优化是提高DNA疫苗免疫保护效果的有效策略之一,编码氨基酸密码子的摇摆性导致不同物种的细胞在蛋白翻译过程中具有密码子使用的偏嗜性.哺乳动物细胞在蛋白翻译过程中与病毒蛋白氨基酸密码子使用频率存在着明显差异,因此,为了提高表达含有PRRSV GP5蛋白基因DNA疫苗的免疫效应,本研究通过人工合成的方法将GP5蛋白基因的密码子改造为猪体嗜好的密码子,并将其作为免疫原基因,连同野生型GP
为研究猪瘟SM株强毒株和HCLV株E2蛋白主要抗原结构域在分子水平和免疫水平上的差异,用PCR技术从重组质粒分别扩增了SM株和HCLV株E2基因的主要抗原结构域ABCD和C片段,分别克隆于pMAL-p2X载体中,经PCR和测序鉴定,E2基因的2个主要抗原结构域片段的位置、大小和读码框均正确.将构建的重组质粒转化到表达菌BL21-CodonPlus(DE3)-RP,对表达产物进行SDS-PAGE电泳
为了明确口蹄疫病毒持续感染和口蹄疫病毒基因变异之间的潜在关系,研究口蹄疫病毒结构蛋白VP1和非结构蛋白3ABC基因在持续感染动物体内的动态变化规律.用O/Akesu/58 FMDV以104ID50/mL剂量舌面穿刺接种5头中国黄牛.探杯定期采集实验牛咽喉部黏性液体(O/P液),分离到12株持续感染毒株.RT-PCR方法扩增了VP1和3ABC基因,克隆测序后分析发现VP1基因出现16个核苷酸位点的固
本研究利用RT-PCR方法测定了Asia1型口蹄疫病毒YNBS/58株的基因组序列,全长为8164nt,编码区长6990nt,编码2329个氨基酸;P1基因由2199nt组成,其中VP4、VP2、VP3、VP1基因依次包括255nt、657nt、654nt和633nt,5非编码区长1061nt,其中S片段长371nt,核糖体进入位点(IRES)片段435nt,功能未知区255nt;3非编码区长11
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