新孢子虫-新蛋白的鉴定、表达与定位

来源 :中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第七次代表大会暨第十二次学术研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:k413287823
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
本研究通过对新孢子虫基因组数据库的分析、筛选,发现并调取了NCLIV_069640基因,进一步分析发现,NCLIV_069640基因大小为2565bp,有一个开放性阅读框,无内含子,包含1个信号肽及4个跨膜区.大部分氨基酸暴露在蛋白表面,推测具有良好的抗原性.对该基因进行原核表达和纯化,得到与GST融合表达的NCLIV_069640重组蛋白.免疫BALB/c小鼠,制备高滴度抗血清,经Western-blot鉴定,在虫体裂解上清中发现有91KD反应条带,与预测大小相符;应用IFA确定NCLIV_069640定位于新孢子虫表面,为一种新的跨膜蛋白.真核细胞的跨膜蛋白一般在其生命活动中发挥着重要作用,推测该蛋白在新孢子虫的侵入、发育和繁殖中具有重要功能,对其功能的相关研究尚在进行之中.
其他文献
Since 2005,black:tailed prairie dogs (Cynomysludovicianus) have been collected for use as research animals from field sites in Kansas,Colorado,and Texas,with the most recent collection from Texas (201
会议
Surveys of Cryptosporidium and Giardia spp.have been rarely performed in companion animals of China in spite of their significance for public health.A total of 188 fecal samples from five veterinary c
为探索隐孢子虫的鸡胚培养方法,本研究将C.andersoni、C.hominis和C.Baileyi卵囊经鸡胚尿囊腔接种于9日龄鸡胚,观察其在鸡胚中的发育繁殖情况.结果显示,C.andersoni和C.Hominis在接种鸡胚后,尿囊膜和尿囊液中均可见到卵囊,但未观察到其他可运动的发育阶段虫体.C.Baileyi在接种鸡胚后,尿囊膜上可见大量卵囊和带虫空泡,尿囊液中可见大量子孢子和裂殖子.说明C.
本研究从纽约水域周边收集了来自15个位点的73个贾第虫镜检阳性的原水玻片.这些水样周边很少有家畜和人的活动,因此贾第虫包囊主要来自野生动物.同时还收集了在这些水样周边经常活动的25种野生动物的197份粪样.对玻片和粪样均用PCR结合测序的方法在tpi,gdh和β-giardin三个位点上对蓝氏贾第虫进行基因分型。本研究结果证实了部分野生动物感染的贾第虫可通过污染其活动过的周围水源而给饮水安全造成危
为研究犬猫蓝氏贾第虫基因分型及对比各基因位点的分型差异.采用多位点基因分型方法(MLST),通过普通PCR及套式PCR对采自广东犬和猫蓝氏贾第虫分离株的小亚基核糖体RNA(16S rRNA)、β贾第素(bg)和磷酸丙糖异构酶(tpi)三个基因位点进行扩增、克隆、测序、NCBI比对以及MegAlign软件分析,建立系统进化树,确定其基因型.结果发现1个样品为混合感染,既有A型又有F型,1个样品被tp
本研究以来自于沈阳地区散养的52份犬的粪便样品和沈阳地区某警犬基地犬152份粪便样品作为实验材料,利用粪便基因组提取试剂盒提取基因组,以此为模板利用蓝氏贾第虫TPI基因片段的高特异性引物进行巢式PCR扩增.通过对PCR产物的序列进行比对分析,发现了共计27个阳性样品,7种基因亚型,其中散养犬的样品中检测到10个阳性样品,感染率为30.77%,警犬基地犬的样品中检测到17个阳性样品,感染率为9.87
本研究利用改进的DMEM培养基体外培养结肠小袋纤毛虫滋养体,将不同浓度的中草药煎剂加入其中,采用机率单位法,计算不同中草药抗结肠小袋纤毛虫的半数致死浓度(LC50),并进行比较.结果从30种中草药中筛选出半数致死浓度低于l00g/L 16种,半数致死浓度(LC50)由低到高的顺序是常山、五倍子、乌梅、葛根、百部、二花、甘草、黄芩、知母、槟榔、苦楝皮、诃子、贯众、使君子、巴豆和青蒿,这些中草药品种可
本研究对分析新孢子虫基因组获得的含有SRS结构域的40-KD表面抗原(NcP40)基因进行了原核表达和纯化,结果显示NcP40在E.coli中成功表达,且纯化结果良好,终浓度为3.07mg/ml.经Western-blot分析NcP40与弓形虫血清没有交叉反应,为新孢子虫特异性抗原.以纯化好的NcP40作为抗原建立新孢子虫间接ELISA检测方法并对ELISA条件进行了优化,优化结果为NcP40-E
本研究扩增获得GRA 11和GRA6,测序与结构分析发现,GRA 11基因全长2322bp,无内含子,分子量约为82.817kDa,共有碱性氨基酸121个,酸性氨基酸99个,存在信号肽和跨膜区;GRA6全长为582-bp,无内含子,分子量约为19kDa,存在信号肽和跨膜区.分别将GRA 11和GRA6插入原核表达载体pE-T28a和pGEX-6p-1,表达、纯化蛋白,经鉴定后,分别免疫BABL/c
本研究通过ToxoDB数据库和生物信息学方法获得一个与弓形虫致密颗粒基因(TgGRA14)较高同源的新孢子虫基因,对该新基因进行克隆、测序,并命名为新孢子虫GRA 14(NcGRA 14).为研究新孢子虫GRA 14在入侵宿主细胞时的分泌表达和定位情况,通过原核表达NcGRA14并制备鼠源多抗,以Western blot对该蛋白进行虫体内源性鉴定,以间接免疫荧光技术对该蛋白在虫体入侵不同时间段分泌