昆虫微孢子虫部分表面蛋白的Shotgun鉴定与分析

来源 :华南农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:nayinian2688
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
微孢子虫(microsporidia)是一类细胞内专性寄生的单细胞真核生物,以对环境具有抗性的自由孢子的形式进行感染和传播,可广泛寄生于几乎所有的动物,包括原生动物和人类。本文主要针对昆虫微孢子虫在感染、入侵寄主过程中起重要作用的孢子表面蛋白开展了蛋白质组学的初步研究。在比较SDS法、碱溶法和沸水浴法等抽提微孢子虫孢子表面蛋白的方法基础上,相继进行了SDS-PAGE电泳、Shotgun质谱鉴定与生物信息学的分析研究,并获得了如下结论:   (1)沸水浴法抽提微孢子虫孢子表面蛋白的效果较为理想。通过比较SDS法、碱溶法和沸水浴法抽提家蚕微孢子虫、柞蚕微孢子虫、桑尺蠖微孢子虫、小菜蛾微孢子虫和斜纹夜蛾微孢子虫等孢子的表面蛋白,认为沸水浴法抽提的表面蛋白的主要蛋白条带的相对蛋白含量较高,且该方法抽提表面蛋白步骤简单、重复性好。   (2)获得了沸水浴法抽提微孢子虫孢子表面蛋白的SDS-PAGE图谱。图谱分析发现家蚕微孢子虫、柞蚕微孢子虫、桑尺蠖微孢子虫、小菜蛾微孢子虫和斜纹夜蛾微孢子虫的表面蛋白均出现了一条介于26.0kDa-33.0kDa之间的共同主带。在28kDa处,除小菜蛾微孢子虫无蛋白条带外,其余四种微孢子虫均有明显条带。在26kDa处,除柞蚕微孢子虫无蛋白条带外,其余四种微孢子虫均有明显条带。   (3)采用Shotgun质谱鉴定了柞蚕微孢子虫和家蚕微孢子虫部分表面蛋白。对SDS-PAGE图谱的相同位置蛋白条带,利用Sequest软件搜索本地蛋白质库鉴定到了5个柞蚕微孢子虫假定的表面蛋白,分别命名为NaHSWP1、NaHSWP2、NaHSWP3、NaHSWP4和NaHSWP5。其中NaHSWP1、NaHSWP3和NaHSWP4与家蚕微孢子虫的表面蛋白SWP30(gi259511816)、HSWP(西157382914)和SWP12(gi257096789)相似性最高,而NaHSWP2与Microsporidium sp.TB-2M-H1的假定表面蛋白HSSP(gi29691978)相似性最高,而NaHSWP5与SLT-1α(gi134536)相似性最高。另外还鉴定到了5个家蚕微孢子虫假定的表面蛋白,分别是SWP30(gi259511816)、HSWP(gi157382914)、SWP32(gi259511817)、SWP25(gi259511814)和与Microsporidium sp.TB-2M-H1的假定表面蛋白HSSP(gi29691978)相似性最高的NbHSWP。   对图谱的不同位置蛋白条带,通过Mascot搜库软件对NCBI非冗余蛋白质数据库进行检索,经过人工筛查高可信度蛋白质结果,获得了2个家蚕微孢子虫假定的表面蛋白SWP30(gi259511816)和HSWP(gi157382916),而仅获得了1个柞蚕微孢子虫假定的表面蛋白NaHSWP6。其中NaHSWP6与Lysozyme C(gi126608)相似性最高。   (4)柞蚕微孢子虫假定表面蛋白NaHSWP3、NaHSWP4、NaHSWP5和NaHSWP6的生物信息学分析。结果显示,NaHSWP3具有1个潜在的信号肽和跨膜结构域,主要定位于内质网。NaHSWP4具有一个BAR蛋白家族结构域,位于第112-225位氨基酸处。NaHSWP5具有2个核糖体失活蛋白RIP家族特征区段和志贺样毒素亚基A区段。NaHSWP6具有1个溶菌酶C区段,位于第23~147位氨基酸残基处。
其他文献
介绍了连续热镀锌生产工艺中电解清洗工作原理,分析了电解清洗工艺带钢表面去污效果的主要影响因素,可在生产实践中作为理论参考.
燃煤发电机组飞灰可燃物异常升高的问题较为多见,直接增加了工业企业的经济负担和污染水平,需要给予重视和处理.本文对该燃煤发电机组工作情况进行了观察和总结,分析磨煤机煤
随着城市化的发展和建设,城市中的供水管网质量受到了广泛关注.作为城市化建设的重要组成部分,市政供水管网质量至关重要.但现阶段就整体情况来看,部分市政供水管网还存在漏
桥门式起重机运行时出现啃轨现象较为常见,对于桥门式起重机啃轨现象进行分析,例如多个车轮或一个车轮啃轨分别有其原因,应密切关注是否出现同侧啃轨或者出现两侧往返运行啃
招投标方式是在市场化环境下进行工程、项目、物资的有效交易方式,它运用先进的管理技术和经济的方法进行项目竞争,基实质是以较低的价格获得最优的货物、工程和服务.本文主
在社会经济快速发展的背景下,市场竞争环境日益激烈,对于国有企业来讲,要想在激烈的市场竞争中占据主导位置,就必须加强财务管理和内部控制力度,以国有企业资金使用情况为主,
本文对基于PCI总线的128通道HDLC处理器芯片进行了研究。目前的一些通用芯片中采用将多个32通道HDLC处理器进行堆叠的方法来处理更多的数据通道,文章设计了可以同时处理128个
我国华南地区地处热带亚热带,有面积巨大(达2500多万ha)、种类多样的人工林,由于南方酸性红壤肥力水平低,人工林生长通常受到养分供应的限制。本文以苗木、幼林期、成熟期三个不
棉花黄萎病是棉花生产上主要侵染棉株维管束的真菌性病害之一,该病会引起棉花病株叶片枯萎,蕾铃大量脱落,纤维品质明显下降,有些菌系甚至导致光杆。近年来,棉花黄萎病在我国
本文研究目的是分析我国事业单位财政资金绩效审计与财政税收中存在的问题和形成的原因,采取对财政资金绩效审计与财政税收进行改革等措施,深入研究事业单位财政税收的发展趋