SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR法检测猪流感H3N2亚型病毒方法的建立

来源 :中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第四次猪病学术研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户：shenxiaoxia123

【摘要】

：

本实验针对H3N2亚型流感病毒神经氨酸酶基因建立SYBR GreenⅠ荧光RT-PCR检测方法。根据GenBank上的SIV N2基因序列设计一对引物，扩增片段406bp。纯化扩增目的片段后连接pMD18-

【作者】

：

孙忠晟[1]尹燕博[2]王平[1]韩丽敏[1]张思娟[1]

【机构】

：

青岛澳兰百特生物工程有限公司青岛 266101

【出处】

：

中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第四次猪病学术研讨会

【发表日期】

：

2010年期

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本实验针对H3N2亚型流感病毒神经氨酸酶基因建立SYBR GreenⅠ荧光RT-PCR检测方法。根据GenBank上的SIV N2基因序列设计一对引物，扩增片段406bp。纯化扩增目的片段后连接pMD18-T载体中，命名为pMD18-TN2，转化入E.coli DH5α，测序正确作为阳性模板，优化反应务件建立方法。此荧光PCR方法所能检测最低病毒含量为75 copies/μL，拥有良好的特异性和重复性。此方法的建立将为流感病毒N2亚型神经氨酸酶基因定型检测提供一种有效方法.

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