【摘 要】
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目的 观察不同浓度肺炎支原体脂质相关膜蛋白(MP-LAMPs)对人支气管上皮细胞(HBEC)表达SPLUNC1的影响,探讨SPLUNC1在呼吸道感染中的作用及与肺炎支原体感染的量效关系及时效关系.方法 通过间接免疫荧光法观察SPLUNC1蛋白在HBEC细胞内定位；不同浓度MP-LAMPs (0.1、0.5、1.0、5.0μg/mL)刺激HBEC后,通过实时荧光定量FQ-PCR法检测不同时间点(2h
【机 构】
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湖南省人民医院儿科,湖南 长沙 410005
【出 处】
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庆祝中国当代儿科杂志创刊15周年大会暨当代儿科论坛
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目的 观察不同浓度肺炎支原体脂质相关膜蛋白(MP-LAMPs)对人支气管上皮细胞(HBEC)表达SPLUNC1的影响,探讨SPLUNC1在呼吸道感染中的作用及与肺炎支原体感染的量效关系及时效关系.方法 通过间接免疫荧光法观察SPLUNC1蛋白在HBEC细胞内定位；不同浓度MP-LAMPs (0.1、0.5、1.0、5.0μg/mL)刺激HBEC后,通过实时荧光定量FQ-PCR法检测不同时间点(2h、4h、8h、16 h及24h)SPLUNC1基因表达；同时用0.5 μg/mL MP-LAMPs诱导HBEC不同时间点通过Western-blot法检测SPLUNC1蛋白的表达.结果 SPLUNC1蛋白主要分布于细胞胞浆中；在相同时间点,不同浓度的MP-LAMPs能诱导SPLUNC1表达上调,其中0.5 μg/mL MP-LAMPs浓度组SPLUNC1基因表达量最显著,不同浓度组间比较差异有统计学意义(P＜0.01)；在同一浓度组,MPLAMPs刺激细胞2h后SPLUNC1基因及蛋白表达量开始上调,并在4h时达高峰,随着时间延长逐渐下降,不同时间组间比较差异有统计学意义(P＜0.01).结论 MP-LAMPs能诱导HBEC细胞SPLUNC1表达上调,并成一定的剂量及时间依耐性,其表达量最佳剂量和时间点为0.5 μg/mL MPLAMPs刺激HBEC 4 h,其表达主要在肺炎支原体感染早期,推测可能参与MP感染最初的防御作用.
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