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背景及目的:托法替尼(Tofacitinib,CP-690550)是以JAK3激酶为靶点的抗炎药物,临床结果显示其可有效地治疗类风湿性关节炎(RA)等自身免疫性疾病。作为首个口服的类似TNFα拮抗剂的药物,将来可能成为治疗RA的常用药物。感染性疾病是长期使用免疫抑制剂常见副作用。本研究的主要内容就是利用白色念珠菌感染模型考察CP-690550是否存在的诱发真菌感染的副作用效应,为临床研究进行初步探索。实验方法结果:将健康人外周血中分离得到的中性粒细胞在炎性细胞因子环境与调理后的白色念珠菌共培养2h后,涂布琼脂培养板,计算菌落数以考察中性粒细胞的体外杀菌能力。炎性细胞因子(IFNγ,TNFα等)可加强中性粒细胞的杀菌能力。在杀菌体系中加入CP-690550干预,发现其并不影响中性粒细胞杀菌能力;但在加入炎性细胞因子的体外杀菌体系中,CP-690550可抑制IFNγ、TNFα对中性粒细胞杀菌能力的增强作用。进一步利用FITC标记的zymosan以及FITC标记的白色念珠菌为探针,考察CP-690550对人中性粒细胞以及炎性因子环境下的吞噬功能的影响,结果表明IFNγ与TNFα均可增强中性粒细胞的吞噬作用,而CP-690550可抑制其增强效果。白色念珠菌刺激中性粒细胞所产生的氧化爆发也是杀伤真菌的重要因素,可利用罗丹明123作为探针检测细胞氧化爆发的强度,结果表明CP-690550可抑制IFNγ与TNFα刺激的氧化爆发。进一步利用小鼠白色念珠菌感染模型考察CP-690550体内对小鼠真菌清除的影响。尾静脉接种10~7白色念珠菌,同时每8h腹腔注射一次15 mg/kg CP690550,24h后取脏器考察脏器中的真菌载量,结果表明CP-690550不影响小鼠急性期对白色念珠菌清除作用。每天腹腔注射15 mg/kg CP-690550,观察感染小鼠的生存情况,结果显示CP-690550可显著缩短小鼠生存期。结论:实验结果提示CP-690550不影响人中性粒细胞的杀菌作用,但抑制感染后炎性因子对中性粒细胞杀菌作用的增强作用,缩短小鼠白色念珠菌感染模型的生存期。因此,本研究提示RA患者长期使用CP-690550可能存在诱发白色念珠菌体内感染的潜在风险。