【摘 要】
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目的:初步探索YAP/TAZ过表达在不同基质硬度刺激小鼠间充质干细胞株C3H10T1/2成软骨分化过程中的作用及机制,为治疗性干预软骨组织再生提供力学分子基础。材料方法:采用慢病
【机 构】
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四川口腔医院有限责任公司; 四川大学华西口腔医院口腔正畸科; 口腔医学国家重点实验室(四川大学);
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目的:初步探索YAP/TAZ过表达在不同基质硬度刺激小鼠间充质干细胞株C3H10T1/2成软骨分化过程中的作用及机制,为治疗性干预软骨组织再生提供力学分子基础。材料方法:采用慢病毒载体包装YAP/TAZ过表达重组质粒稳定转染C3H10T1/2细胞。分别将YAP过表达、TAZ过表达、空病毒转染细胞用Cytosoft?基质材料建立基质硬度-成软骨分化模型,通过RT-PCR、免疫荧光、番红O、阿利新蓝染色法检测各组细胞在0.5kPa和32kPa硬度基质上培养14天后成软骨分化标志物的表达情况。此外,对各组转染细胞进行F-actin鬼笔环肽染色及镜下观,评价YAP/TAZ对C3H10T1/2细胞骨架形态的影响。结果:各组别中0.5kPa比32kPa细胞成软骨标志物表达含量更高,YAP/TAZ过表达C3H10T1/2细胞成软骨标志物表达较对照组更低。此外,0.5kPa细胞骨架形态比32kPa更收缩;而YAP/TAZ过表达组细胞骨架铺展度明显比空病毒组大。结论:YAP/TAZ在不同基质硬度刺激C3H10T1/2成软骨分化中可能起到负调控作用。YAP/TAZ过表达使细胞形态铺展,不利于其成软骨分化。
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