健康人外周血树突状细胞的体外培养及其鉴定

来源 :第十八次全国中西医结合肝病学术会议论文汇编 | 被引量 : 0次 | 上传用户:tananhua252
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目的:建立树突状细胞(dendritic cells,DCs)体外培养的方法。方法:取健康人新鲜外周血,经密度梯度离心法分离,获得单个核细胞,取贴壁细胞在含重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(rhGM-CSF)1000U/ml、重组人白细胞介素4(rhlL-4)500U/ml完全培养基中诱导培养DCs,用倒置显微镜观察其体外培养过程中的形态特征,透射电镜分析DCs细胞内部结构,流式细胞仪检测其表型分子的表达,并对其进行鉴定。结果:经本实验体系从外周血PBMCs可诱导DCs生成量为每20ml约(2.5-4.8×10~6),透射电镜证实呈典型的DCs细胞形态学,用流式细胞仪检测DCs的表型分子的表达分别为FITC-CDla 49.52±5.11%、PE-HLA-DR 91.19±4.29%、FITC-CD80 59.42±7.05%、PE-CD86 86.21±2.39%。结论:利用rhGM-CSF和rhIL-4可以从外周血中扩增出大量DCs,为DCs的深入研究和临床应用奠定了基础。
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