【摘 要】
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嗜水气单胞菌是水产动物常见致病菌,其血清型众多,外膜蛋白是其共同的保护性抗原.根据已发表的嗜水气单胞菌外膜蛋白基因(omp)的核苷酸序列设计引物,扩增出嗜水气单胞菌AS1.927主要外膜蛋白的全长基因片段(Momp).将此基因片段插入表达载体pNZ8048 构建重组质粒,转化乳酸乳球菌(Lactococcus lactis) NZ9000,制备表达嗜水气单胞菌主要外膜蛋白乳酸乳球菌活菌疫苗,并将该
【机 构】
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浙江大学动物科学学院 教育部动物分子营养学重点实验室, 浙江 杭州 310029
【出 处】
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中国畜牧兽医学会动物微生态学分会第四届第九次全国学术研讨会暨饲料和动物源食品安全战略论坛
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嗜水气单胞菌是水产动物常见致病菌,其血清型众多,外膜蛋白是其共同的保护性抗原.根据已发表的嗜水气单胞菌外膜蛋白基因(omp)的核苷酸序列设计引物,扩增出嗜水气单胞菌AS1.927主要外膜蛋白的全长基因片段(Momp).将此基因片段插入表达载体pNZ8048 构建重组质粒,转化乳酸乳球菌(Lactococcus lactis) NZ9000,制备表达嗜水气单胞菌主要外膜蛋白乳酸乳球菌活菌疫苗,并将该活菌疫苗口服免疫BALB/c小鼠.重组基因工程菌培养液上清的SDS-PAGE结果表明,经Nisin诱导后,主要外膜蛋白在乳酸乳球菌(Lactococcus lactis)NZ9000获得有效表达.免疫保护试验表明,免疫小鼠对同源菌株AS1.927约100倍半数致死量的攻击的免疫保护率为 87.5％.经重组基因工程菌两次免疫后的小鼠血清中IgG水平显著高于对照组(P＜0.01),说明分泌表达主要外膜蛋白的乳酸乳球菌能使小鼠产生有效的体液免疫反应.本试验结果提示,重组乳酸乳球菌能够有效地将外膜蛋白分泌到胞外并具有较好的免疫保护效果,这为解决抗嗜水气单胞菌引起的感染提供思路和嗜水气单胞菌外膜蛋白基因工程口服疫苗载体的产业化应用奠定基础.
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近几年,猪呼吸道病综合征(PRDC)已成为猪病中最为突出的疾病,它呈全国性发病,防治困难,反复发生,且很难清除.在许多地区(或场)发病率达30％～70％,致死率达10％～50％,它除直接造成死亡外,还明显增加了淘汰率,以及因饲料利用率减少(5％～25％),增重速度缓慢,推迟上市(10～30天)等,致使养猪生产成本大为增加.当前有关PRDC的报道和刊出文献日增,且相关的学术会议或猪病讲座也往往以该病
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