鸭坦布苏病毒E蛋白原核表达与活性鉴定

来源 :第五届中国兽药大会(中国畜牧兽医学会动物药品学分会2014年学术年会、中国畜牧兽医学会生物制药学分会暨中国微生物学会兽医 | 被引量 : 0次 | 上传用户:as55059550
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
经生物学软件DNAstar分析,以DTV基因组RNA为模板,经RT-PCR扩增E基因864bp的片段,将目的片段定向克隆至pET30a原核表达载体中,酶切及测序鉴定均正确后,阳性质粒转化BL21表达菌,经IPTG诱导获得了以包涵体形式表达的重组蛋白.将重组蛋白变性、纯化和复性后,免疫印迹检测表明重组蛋白具有良好的抗原性和特异性,为本实验室进行DTV血清学快速检测方法的建立、单克隆抗体的制备以及亚单位疫苗的研究奠定了基础.
其他文献
目的:对猪肺脏不同部位巨噬细胞异质性及其分子机制初探.方法:从猪肺组织中分离得到PAM、PIM、IM三种细胞,光学显微镜观察PAM、PIM、IM细胞的大小及形态,流式细胞仪检测PAM、PIM、IM细胞膜蛋白CD86.CD163的表达,实时荧光定量PCR技术检测PAM、IM、PIM三种细胞iNOs、IL-IB.Arg、CD163.MannR、IL-1O的表达量.结果:PAM细胞较大、不均一,IM较小
Autoinducer 2 (AI-2) is a universal signal molecule mediating intra- and interspecies communication among bacteria.AI-2 is a byproduct of the LuxS enzyme during the catabolism of S-adenosylhomocystein
GX0101 was the first reported field strain of recombinant Mareks disease virus (MDV) that contained a long terminal repeat (LTR) from the reticuloendotheliosis virus (REV).It is a very virulent MDV st
Avian pathogenic Escherichia coli (APEC),uropathogenic E.coli (UPEC),and newborn meningitis-causing E.coli (NMEC) establish infections in extraintestinal habitats (extraintestinal pathogenic E.coli; E
本研究使用自行研制的3批鸭出血性卵巢炎活疫苗(WFlOO株),无菌检验合格后经肌肉注射5日龄SPF雏鸭和健康易感产蛋鸭进行安全性试验,10羽份/只.接种雏鸭和产蛋鸭在观察期内精神状态、饮食、粪便均正常,接种雏鸭的平均增重与空白对照组无差异,接种产蛋鸭的产蛋率与空白对照组无差异.组织学检验,接种鸭的肝脏、脾脏、卵巢发育正常,表明活疫苗是安全的.将3批活疫苗分别以1.0羽份/只和0.5羽份/只经肌肉注
为了从细胞水平探讨PRRSV GD强弱毒和PRRSV弱毒疫苗感染对外周血淋巴细胞亚群的影响,为疫苗的研制提供理论依据.本研究运用血常规技术和流式细胞技术分析了PRRSV感染SPF猪后,猪体内外周血淋巴细胞亚群变化.试验将30日龄20头SPF猪分成3组,1组感染PRRSVGD第5代强毒株,1组感染GDr180弱毒疫苗株,1组留作对照.与感染后第O、3、7、10、14、21、28、35天采血做外周血淋
目的:准确定位和高效检测猪瘟病毒RNA.方法:本研究设计合成了猪瘟病毒RNA和猪内参基因p-actin的多条特异性探针,在猪瘟病毒中等致病力毒株HeBHHI/95毒株感染PK15细胞中进行蛋白酶K浓度和甲醛固定时间的优化,建立了猪瘟病毒QuantiGeneViewRNA原位杂交检测技术.结果:在荧光共聚焦显微镜下,培养细胞中明亮的红色荧光为猪瘟病毒RNA,且病毒RNA在胞内复制的主要部位是有丰富膜
为了建立激流灌注式生物反应器规模化生产猪繁殖与呼吸综合征活疫苗的生产工艺,本研究以AP20C型生物反应器为生产工具对猪繁殖与呼吸综合征病毒R98株(PRRSV-R98)的增殖水平进行了研究.结果显示,应用激流灌注式生物反应器生产猪繁殖与呼吸综合征病毒96h达到最佳接毒时间,接种后36-39h收获病毒液,效价较转瓶提高十倍以上.
本试验采用3个不同批次的鸡马立克氏病毒(MDV)Meq基因缺失株疫苗(SC9-1株)和2批不同生产厂家的商品化MD疫苗(CVI988/Rispens株)免疫1日龄SPF鸡,6日龄以马立克氏病毒超强毒株rMd5进行攻击,分别观察至70日龄和90日龄开展了两次试验测定其免疫保护效果.结果表明,3批SC9-1株疫苗免疫组的总保护指数分别为96.5%、98.3%、96.6%,差异不显著(P>0.05),免
为摸清我国生猪养殖重点省份猪群中猪伪狂犬病毒感染情况,应用PRV gE-ELISA抗体检测方法,对2012-2013年采集/送检的14801份猪血清样品进行了PRV感染抗体检测.结果共检出PRV野毒感染阳性样品2388份,总体阳性率为16.13%;共检测猪场393个,场的阳性率为44.02%;免疫场291个,检出阳性场158个,阳性率54.2g%.对监测数据进行分类统计,发现华东、华中等我国主要养