聚球藻PEPC基因的正反向表达对脂类合成的调控

来源 :庆祝中国藻类学会成立30周年暨第十五次学术讨论会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:Tongtong07
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聚球藻(Synechococcus)是至今所知长得最快的蓝藻。日本学者已能使这种藻细胞加倍时间缩短到1小时左右.赶上了大肠杆菌的生长速率。本研究选了实验室常用的聚球藻79420为了促进脂类合成,作者选择的技术路线是用反义抑制磷酸烯醇式丙酮酸梭化酶(PEPC)基因的表达。为了设计引物克隆基因,先用生物信息学方法分析了40种蓝藻的PEPC同源序列。还与大肠杆菌、真核藻和高等植物作了比较。这样找到了合适的保守序列,请公司合成后,用PCR技术以念珠藻7120基因组DNA为模板,克隆PEPC基因。这基因连接在pRL-489质粒上构建成正义和反义两种载体。在大肠杆菌中扩增后,转入聚球藻79420经过抗生素筛选后测定正向表达和反向表达的结果。测定结果表明反义PEPC聚球藻的PEPC活性降低了81.9[%]。脂类合成增加了42.9[%];正义PEPC聚球藻的PEPC活性增加了46[%],脂类合成降低了30.8[%]。这两种转基因聚球藻的生长略低于野生型细胞。
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