[目的]为了从地衣细菌中筛选出具有固氮能力的细菌,检测筛选出的固氮细菌中是否存在固氮基因,对固氮细菌的多样性进行研究.[方法]我们将实验室保藏的地衣细菌菌种进行活化,利用无氮培养基筛选出能够固氮的细菌.用CTAB法提取固氮细菌的DNA,并且利用巢式PCR扩增固氮基因(nifH)片段,并对固氮细菌基于16S rRNA基因构建ML系统发育树,对固氮细菌的多样性进行分析.最后,进一步筛选出能够降解酪蛋白,淀粉以及纤维素的地衣固氮细菌.[结果]从地衣中的97株甘油菌中筛选出了19株具有固氮能力的细菌.19株固氮细菌中有11株细菌在第一次的巢式PCR之后,经过琼脂糖凝胶电泳检测出明显的条带,19株固氮细菌经过二次完整的巢式PCR之后,均扩增出了特定的固氮基因的片段.16S rRNA基因分析发现这些固氮细菌来自于3个门,分别是α-变形门、β-变形菌门、厚壁菌门.共分布于6个属,包括鞘氨醇单胞菌属,鞘脂菌属,伯克氏菌属,杆菌属,根瘤菌属,短波单胞菌属.其中鞘氨醇单胞菌属10个菌株,是优势菌种,占52.6％；鞘脂菌属3个菌株；伯克氏菌属3个菌株；杆菌属1个菌株；根瘤菌属1个菌株；短波单胞菌属1个菌株.我们进一步对19株地衣固氮细菌筛选出了18株能够降解酪蛋白、13株能够降解淀粉、9株能够降解纤维素的菌株.[结论]地衣中存在具有固氮能力的细菌,这些细菌来自不同的属,除了根瘤菌属外,还有鞘氨醇单胞菌属,伯克氏菌属等.部分地衣细菌还兼具有分泌蛋白酶、淀粉酶和纤维素酶的能力,为我们进一步研究固氮细菌的生物学活性奠定了基础.