ERK1/2信号通路在Jurkat T细胞增殖调控中的作用

来源 :中国青年科学家论坛暨第四届全国中医药免疫学术研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wly9007
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探讨ERK1/2信号通路在Jurkat T细胞增殖调控中的作用。采用共聚焦显微镜和MTT法检测不同浓度PD98059对Jurkat T细胞集落形成和增殖指数的影响,PI染色结合流式细胞术分析不同浓度PD98059对Jurkat T细胞细胞周期的影响。 利用不同浓度、不同信号通路特异性阻断剂LY294002、AG490、GF109203X和Genistein以及LY294002联合AG490处理Jurkat T细胞,观察它们对Jurkat T细胞集落形成和增殖指数的影响。选用最佳浓度PD98059、LY294002、AG490、GF109203X和Genistein,通过Western Blot检测它们对Jurkat T细胞中ERK1/2、P-ERK1/2和反向CCAAT盒结合蛋白(ICBP90)不同时间表达的影响。 结果显示,PD98059可显著抑制Jurkat T细胞的增殖,呈剂量依赖关系。PD98059可使Jurkat T细胞停滞于G1/G0期,并阻止其进入S期和G2/M期。不同浓度各阻断剂对Jurkat T细胞的集落形成和增殖指数也具有不同的抑制作用,且呈剂量依赖关系。PD98059作用3 h可部分下调ERK1/2的表达,而其它阻断剂对ERK1/2的表达均无影响。PD98059、LY294002作用3 h可明显下调P-ERK1/2的表达,LY294002+AG490、AG490、GF109203X和Genistein也可使P-ERK1/2的表达不同程度下调,各阻断剂作用3 h均能上调Jurkat T细胞中ICBP90蛋白的表达,并以PD98059最为突出;而在24 h这种上调作用更为明显。这些结果提示阻断ERK1/2信号通路可显著抑制Jurkat T细胞的增殖,这种抑制作用与其使Jurkat T细胞停滞于G1/G0期,阻止细胞进入S期和G2/M期有关;PI-3K、TPK、PKC和JAK信号通路可能与ERK1/2信号通路上游关联,ERK1/2信号通路的下游可能通过ICBP90所介导。
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