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为构建稳定表达猪瘟病毒(CSFV)Npro蛋白的PK-15细胞系,本研究采用PCR方法,以pOKl2/F1-9质粒为模板扩增Npro基因,并引入Flag标签序列,将其连到plRES2-EGFP载体,构建重组质粒pGFP-Npro;通过脂质体将pGFP.Npro转染至PK-15细胞中,利用G418加压筛选、纯化得到稳定表达Npro蛋白的细胞系;连续传代30代后,进行RT—PCR、Western blot和激光共聚焦试验,结果表明获得了稳定表达CSFV Npro蛋白的PK—15细胞系。该细胞系可应用于免疫共沉淀与N印蛋白相互作用的宿主蛋白,为进一步研究CSFV N印的功能奠定了基础。