背景和目的:肝细胞癌（hepatocellular carcinoma,HCC）是最常见的恶性肿瘤之一,预后极差。对于小肝癌,手术无疑是治疗的最有效手段,但手术之后几乎难以避免转移和复发;而就诊时已有转移的进展期肝癌,传统方法的疗效更是有限。近年来随着分子生物学、肿瘤免疫学和基因工程技术的发展,以肿瘤免疫治疗（immunotherapy）为代表的肿瘤生物治疗（biotherapy）作为综合治疗中重要的部分为HCC的治疗带来转机。肿瘤的过继免疫治疗（Adoptiveimmunotherapy,AIT）一直是肿瘤生物治疗研究中最为活跃的一个领域,向肿瘤患者转输具有抗肿瘤活性的免疫细胞（特异性的和非特异性的）直接杀伤肿瘤或激发机体免疫反应杀伤肿瘤细胞,达到治疗肿瘤的目的。人工抗原递呈细胞（artificial antigen presentation cell,aAPC）体外活化CTL细胞时具有简化操作流程、重复性好、成本低的优点,而且近年来不断产生令人鼓舞的应用前景。探讨该新型过继免疫疗法对肝癌细胞的作用机制,为CTL细胞进一步临床应用提供理论依据。方法:分离肝癌患者外周血单个核细胞,用磁珠分选法分离出CD8⁺T细胞,取培养对数期的K32/4-IBBL/CD86细胞用丝裂霉素C处理。将两种细胞按不同比例混合培养,分别观察K32/4-IBBL/CD86细胞对CD8⁺T细胞活化和增殖能力,用流式细胞仪检测CTL细胞分泌细胞因子INF-γ的能力及外周血PMBC经混合培养后CD3⁺CD4⁺及CD3⁺CD4⁺与CD3⁺CD8⁺比例变化;用MTT法检测CTL细胞杀伤率。结果:结果发现肝癌患者CD8⁺T细胞经K32/4-IBBL/CD86细胞刺激后,CD8⁺T细胞的增殖能力明显增强,与对照组相比,刺激1、8、15天后增殖能力提高3倍;活化CD8⁺T细胞分泌INF-γ的能力与对照细胞相比明显增强（^*P<0.05）;体外诱导扩增的CTL细胞可以杀伤人肝癌细胞株BEL7402和自体肝癌细胞,而且随着效靶比增强,杀伤作用增强。经活化的CTL细胞杀伤人肝癌细胞株BEL7402和自体肝癌细胞能力较无aAPC刺激活化CD8⁺T强,二者比较,（^*P<0.05）,结果有差异。不同比例混合培养所得的CTL细胞杀伤率不同,按1:1混合培养所得的CTL细胞杀伤率最高,与其他组比较,(^△△P<0.01),结果有显著差异。结论:本研究结果表明人工抗原递呈细胞K32/4-IBBL/CD86细胞可以在体外高效活化肝癌患者CD8⁺T淋巴细胞,促进CD8⁺T细胞增殖和分裂,上调INF-γ分泌,有希望用来体外刺激肝癌患者CD8⁺T淋巴细胞活化,从而在肝癌过继免疫治疗中发挥作用。