【摘 要】
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目的：测定蝎毒素ITX的氨基酸含量，分析其蛋白质的组成。并对其中某些组分进行鉴定。方法：将常压柱分离得到的蜗毒素蛋白ITX，进行氨基酸含量分析；以17cmpH3～10固相pH梯度胶条(immobilized pH gradiednt，IPG)为第一向IEF,18%SDS聚丙烯酰胺凝胶为第二向进行双向电泳(2-D)；PDQuest7-1分析软件分析电泳图谱，筛选目的蛋白，然后对其中两个蛋白点进行基质
【机 构】
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河南中医学院 郑州 450008 河南中医学院 郑州 450008 新乡医学院测试中心 新乡 45
【出 处】
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第七届全国中医药生物化学与分子生物学学术交流会
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目的：测定蝎毒素ITX的氨基酸含量，分析其蛋白质的组成。并对其中某些组分进行鉴定。
方法：将常压柱分离得到的蜗毒素蛋白ITX，进行氨基酸含量分析；以17cmpH3～10固相pH梯度胶条(immobilized pH gradiednt，IPG)为第一向IEF,18%SDS聚丙烯酰胺凝胶为第二向进行双向电泳(2-D)；PDQuest7-1分析软件分析电泳图谱，筛选目的蛋白，然后对其中两个蛋白点进行基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(matrix assisted laserdesorption ionization time of flight massspectrometry，MALDI-TOF-MS)和串联质谱(MS/MS)分析。得到肽质量指纹图谱(peptide massfingerprinting PMF)数据.登陆网站http：//www.matrixscienee.com，用Mascot程序检索NCBInr数据库，鉴定蛋白质。
结果：ITX17种氨基酸的含量从0.14%～11.35%不等；从蝎毒素ITX蛋白样品中共筛选出9个等电点不同，分子量约为5.8kDa的蛋白点，其中蛋白点1、2、3、4位于酸性区，蛋白点5、6、7、8、9位于碱性区。获得了蝎毒多肽的PMF数据。
结论：测定了蝎毒素ITX蛋白的氨基酸含量，其中半胱氨酸含量可能比较高，易于形成二硫键，加大了解聚难度；建立蝎毒素ITX蛋白质组学研究方法。为后续工作奠定了基础。
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