论文部分内容阅读
目的：建立利用微球捕获技术检测血小板微粒(platelet derivedmicroparticles,PMP)的方法并对其进行初步的方法学评价.
方法：采用包被针对血小板膜糖蛋白Ⅲa(CD61)单克隆抗体的检测微球捕获PMP，用CD41 PE结合捕获的PMP,利用流式细胞仪对微球-PMP-CD41 PE复合物进行检测.通过试验优化检测条件;并对方法的重复性和检测线性进行评价.对45例健康人PMP水平进行检测.
结果：检测微球在4℃可以稳定保存90d以上，变异系数0.65％，基本可以满足临床检测的要求.应用CTAD抗凝管采集标本可以有效的抑制PMP的体外释放;室温孵育4h可以达到PMP最大的结合;利用PBS洗涤可以去除检测微球对PMP的非特异性吸附.该方法批内变异系数6.8％;批间变异系数10.4％，有较好的重复性;利用该方法检测血小板活化上清中的PMP。在0～200μ1之间有较好的线性(r=0.9962).45例正常健康成人血液PMP参考范围为1.031～1.766(相对荧光强度).
结论：利用微球捕获技术可以简便、快捷、准确地检测PMP,对于临床出血、血栓性疾病的诊治具有重要意义.