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目的饱和脂肪酸(SFAs)诱导的脂毒性在非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)的发病机制中起着重要作用;棕榈酸(palmitate, PA)则是肝细胞脂毒性的主要诱发者。本文旨在研究升麻素对棕榈酸诱导的HepG2细胞脂毒性的保护作用及机制。方法体外培养HepG2细胞,用棕榈酸构建脂毒性模型,MTT法筛选有效的升麻素作用浓度,对细胞进行升麻素药物干预:1、LDH、 Hochest染色、Western Blot检测Cleaved-caspase3蛋白水平,综合分析升麻素干预前后肝细胞凋亡的情况变化,验证升麻素对PA诱导肝细胞损伤的保护作用;2、通过酶联免疫法(ELISA)、免疫组学等检测细胞上清液中炎症信号因子白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量及线粒体膜电位(MMP)及活性氧(ROS)含量的变化,Western blot检测细胞内Bcl-2/Bax、IL-6、TNF-alpha、IL-1beta等蛋白水平表达,分析升麻素作用前后肝细胞氧化应激、炎性反应变化;3、Western blot检测细胞内MAPKs(ERK1/2、JNK、p38)、AMPK、SIRT1、HO-1、TLR4及细胞核内NRF2、p65等蛋白水平变化,探究升麻素保护肝细胞脂毒性的作用机制。结果 1、升麻素干预HepG2细胞后,与正常组相比,PA干预组(模型组)的细胞内LDH水平、Cleaved-caspase3蛋白表达及细胞凋亡率显著增加,与模型组相比,升麻素干预组细胞内LDH水平、Cleaved-caspase3蛋白表达及细胞凋亡率均有所下降且呈剂量依赖关系,其差异具有统计学意义。模型组较对照组上清中IL-6、TNF-α水平均有显著升高,与模型组相比,升麻素干预后IL-6、TNF-α表达显著降低,同时降低了PA诱导升高的ROS和MMP的水平。Western blot检测结果表明,模型组较对照组相比,Bax蛋白表达增高,Bcl-2蛋白含量降低;升麻素干预后,Bax蛋白含量降低,Bcl-2蛋白含量升高。与正常组相比,PA组的MAPKs、TLR4蛋白表达均有显著升高,升麻素组与模型组相比,p-ERK1/2、p-JNK表达并无显著性差异,p-p38MAPK和TLR4蛋白表达水平下调且均具有显著性差异。结论升麻素可通过TLR4/p38MAPK信号通路改善PA诱导的肝细胞脂毒性,提示升麻素可能改善非酒精性脂肪肝病。