玉米内州萎蔫病菌的Bio-PCR和Bio-realtime PCR检测方法

来源 :中国植物病理学会2010年学术年会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:finallove
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玉米内州萎蔫病(Gosss Bacterial Wilt and Leaf Blight of Corn)是北美玉米生产中的严重病害之一,1969年首次报道于内布拉斯加州,至今为止已经扩散至爱荷华州、堪萨斯州、南达科塔州、科罗拉多州、密歇根、明尼苏达、伊利诺斯州、威斯康星州和加拿大安大略湖等地区.本研究利用人工注射接种的方法模拟了自然感病的玉米籽粒,研究了籽粒表面消毒的条件,在保证表面消毒效果的同时,可以较好地保证内部细菌不受影响,避免降低反应灵敏度,有利于后续半选择性培养基法的检测。通过Cmn的半选择性培养基sCNS进行分离培养,其灵敏度可以检测到一万粒玉米籽粒中一粒携带1.2×10-6CFU Cmn的籽粒。 将Cmn的半选择性培养基sCNS和特异性的引物和探针相结合,构建了进出境玉米种子上Cmn的Bio-PCR和Bio-realtime-PCR检测方法,可以有效地从样品中分离和检测Cmn,在口岸检疫部门具有实际的应用价值。
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