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目的：重度子痫前期(SPE)被认为是一种继发于胎盘缺氧的严重妊娠合并症,表现为妊娠20周后出现高血压、蛋白尿及多组织功能损伤,严重危胁着母儿的生命与健康.巢蛋白(Nestin)是一种中间丝细胞骨架蛋白,参与神经细胞发育,是传统观念的神经干细胞标记物.近年来发现Nestin也参与血管的发生与维护,是新生血管内皮细胞标志物之一.其表达状况与缺氧环境有关.本研究利用缺氧诱导剂建立体外细胞缺氧环境,观察人绒毛膜上皮JEG-3细胞系和人脐静脉内皮细胞(HUVEC)-两种胚胎干细胞在不同缺氧时间和缺氧程度中Nestin的表达状况,为胎盘缺氧在SPE发生、发展中的作用提供实验依据.材料与方法：利用二氯化钴(CoCl2)模拟体外缺氧环境,分别诱导JEG-3细胞系及HUVEC化学缺氧.提取不同缺氧条件下各组细胞mRNA,在核酸水平上检测细胞Nestin基因的表达水平；同时收集各组细胞培养基,利用Nestin ELISA试剂盒检测细胞培养基中Nestin蛋白水平并进行统计学分析.结果：1、JEG-3细胞系在CoCl2浓度为300umol/L化学缺氧条件下分别培养6h、12h、24h及48h,后三者Nestin mRNA表达量均明显高于6h者(P＜0.01).JEG-3细胞系在CoCl2浓度300umol/L的缺氧环境中培养24h,与未加入CoCl2的培基中培养24h者比较,Nestin mRNA表达量增加(P＜0.05).随着缺氧时间的延长,培养基中Nestin蛋白水平逐渐降低,其中6h与48h之间Nestin蛋白水平差异有统计学意义(P＜0.05).IEG-3细胞系在CoCl2浓度300umol/L培养基中培养24h,与未加入CoCl2的培基中培养24h者比较,培养基中Nestin蛋白水平下降,但无统计学意义(P＞0.05).2、JEG-3细胞系在CoCl2培养基中培养24h,随着CoCl2浓度增加,Nestin mRNA表达水平变化不大(P＞0.05)；培养基中Nestin蛋白水平也无统计学差异(P＞0.05).3、HUVEC在CoCl2浓度300umol/L化学缺氧条件下,随着缺氧时间延长,12h、24h及48h者Nestin mRNA表达量均显著高于6h (P＜0.01).CoCl2浓度300umol/L化学缺氧24h,与未加入CoCl2化学缺氧情况者比较,Nestin mRNA表达量增加(P＜0.05).随着缺氧时间延长,HUVEC培养基中Nestin蛋白水平无明显变化(P＞0.05).CoCl2浓度300umol/L化学缺氧24h,与未加入CoCl2化学缺氧情况者比较,培养基中Nestin蛋白水平下降(P＞0.05).4、HUVEC在CoCl2化学缺氧条件下培养24h,其浓度在400umol/L时Nestin mRNA表达量高于200umol/L及600umol/L(P＜0.05；P＜0.01),CoCl2浓度在600umol/L时Nestin mRNA表达量低于200umol/L者(P＜0.01).随着CoCl2浓度增加,Nestin蛋白浓度无明显改变(P＞0.05).结论：1、短时间慢性缺氧可以促进Nestin mRNA在滋养细胞和胎盘血管内皮细胞中表达,可能与子痫前期发病过程中机体应对缺氧的保护性机制有关.2、慢性缺氧时间(一定范围内)延长是影响Nestin在滋养细胞中表达的不利因素,可能与子痫前期患者胎盘浅着床及血管重塑功能障碍有关.3、慢性缺氧时间(一定范围内)延长对Nestin在胎盘血管内皮细胞中长时间表达及其细胞保护功能起到支持作用.4、慢性缺氧程度(一定范围内)对Nestin在滋养细胞中表达影响较弱.慢性缺氧程度稍加重可促进Nestin mRNA在胎盘血管内皮细胞中表达,但缺氧程度明显加重可能是限制Nestin mRNA在胎盘血管内皮细胞中表达的不利因素.