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APC基因杂合缺失在胃癌的早期发生过程中起重要作用,检测基因突变的方法学研究将有助于临床准确诊断胃癌。本实验采用PCR扩增胃癌及癌旁正常组织中APC基因易发生杂合缺失的第十一外显子的部分碱基序列,扩增样品分别经96℃变性和Rsa Ⅰ酶切处理,以CE-SSCP、CE-RFLP、PAGE-SSCP对其杂合缺失情况进行检测。PAGE凝胶浓度为15%;CE筛分介质PEO浓度3.0%,pH 8.2,电压15 KV温度15℃,λcx=488nm,λem=520nm荧光检测。检出率由高到低为:CE-SSCP(10/35)>PAGE-SSCP(8/35)>CE-RFLP(6/35)。
CE-SSCP可作为大规模胃癌早期诊断的简便可靠的方法。