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近年来一种新的葡萄枝干病害在湖北省公安产区频繁出现,主要引起葡萄枝干流胶、溃疡,树势衰弱,严重时甚至整株死亡。采集病害样品进行病原分离和鉴定,以期为后期防控提供理论依据。采用常规组织分离法从病害样品中分离病原菌。在PDA培养基上观察菌株的生长情况,记录菌落形态和颜色。在显微镜观察下观察分生孢子的形态特征,并测量分生孢子大小。提取菌丝基因组DNA,采用真菌通用引物ITS1/ITS4和Bt2a/Bt2b分别对rDNA-ITS和β-tubulin基因片段进行PCR扩增,PCR产物纯化回收后进行测序分析。将获得的序列提交NCBI数据库,并进行同源性比对分析,采用MEGA6.0的Neighbor-joining法构建系统发育树。在温室盆栽的‘夏黑’葡萄上进行致病力测定,采用针刺法将菌丝块接种到消毒后的‘夏黑’枝条上,同时接种无菌培养基作为对照。每个处理接种5株,3次重复。所有处理植株均置于温室中,温度(25±1)℃,相对湿度90%。分离获得的病原菌在PDA上菌落呈现圆形或近圆形,菌落边缘不整齐,初期灰白色,后期变灰黑色,气生菌丝发达。分生孢子无色、透明、单胞,纺锤形或椭圆形,大小为(18.9～23.3)μm×(6.1～7.8)μm,平均为(21.4±1.6)μm×(6.8±0.6)μm(n=50),长宽比为2.4～3.8。对获得菌株的ITS和β-tubulin基因分别进行扩增、测序,获得长度分别为553和419 bp的片段。在GenBank中进行同源性比对,发现该菌株的ITS基因序列与多个小新壳梭孢(Neofusicoccum parvum)菌株的相似度高达100%,其β-tubulin基因序列与多个N.parvum菌株的同源性也都在98%以上。系统发育进化树分析结果显示该病原菌与寄主为葡萄(JX462272.1)、橡胶(KY009943.1)、柑橘(MG879024.1)等多个N. parvum菌株以99%自展支持率聚在同一分支,与它们亲缘关系最近。结合形态学特征及分子鉴定,确定该病原菌为N. parvum。致病性测定结果显示‘夏黑’枝条被病原菌侵染14d后,接种部位溢出透明状胶体,韧皮部出现不规则形黑褐色溃疡斑,而PDA琼脂块接种的阴性对照枝条均未发病。将发病组织进行病原菌的再分离,均能够获得与原接种菌相同的病原菌,由此判定该病原菌为导致葡萄枝条产生流胶症状的病原菌。小新壳梭孢可侵染柑橘、桉树、石榴、葡萄等多种植物,并可引起柑橘、杧果等产生溃疡流胶症状,引起葡萄表现果实干缩、掉粒、果梗干枯,树势减弱等症状,但尚未见有关N.parvum侵染引起葡萄枝干流胶的报道。本结果证实N.parvum侵染葡萄可引起枝条表现典型的流胶症状,仅在湖北省公安产区频繁发现这种病害。