根癌农杆菌介导拟南芥AVP1基因遗传转化紫花苜蓿的研究

来源 :中国草学会牧草育种专业委员会2007年学术研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:dfsdasdas
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以新疆大叶苜蓿为材料,用根癌农杆菌(Agrobacteriumtumefaciens)介导拟南芥(Arabidopsis thaliana)液泡膜H+-PPase基因AVP1,对其进行遗传转化.主要结果如下:(1)建立了紫花苜蓿植株再生和遗传转化体系,该体系具有时间短(18~19周),转化率高(7.8%)的特点。(2)利用这一转化体系,成功获得了抗卡那霉素阳性植株,PCR分析结果表明,其中95%以上的植株为AVPI转基因植株:对不同系列转基因植株的RT-PCR分析发现,不同系列中AVPI,基因的表达水平不同。(3)与野生植株相比,转基因紫花苜蓿植株表现出较强的耐盐性:200 mmol·L-1NaCl处理10天后,转基因植株生长良好,野生植株生长则严重受抑,出现萎蔫,甚至死亡:盐处理下,与野生植株相比,转基因植株具有较低的叶片MDA含量和相对质膜透性、较高的根系活力和净光合速率:不论盐处理与否,与野生植株相比,转基因植株叶和根中积累了更多的Na+、K+和Ca2+。这些结果表明,AVPI的超表达增强了紫花苜蓿转基因植株液泡膜质子泵活性,从而提高了包括液泡膜Na+/H+逆向转运蛋白在内的各种二级运输载体的转运效率,将细胞质中更多的Na+转运到液泡内,降低了过量Na+对细胞质的毒性,并促进了细胞对K+和Ca2+的吸收,维持了细胞内离子的稳态平衡,降低了细胞的渗透势,从而提高了转基因紫花苜蓿的耐盐性。对转基因紫花苜蓿抗旱性的分析正在进行之中.
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