HEV ORF3真核表达载体的构建、表达及生物学功能初探

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<正>目的:构建表达戊型肝炎病毒(HEV)ORF3-pEGrP和ORF3-pXF2RH融合蛋白的真核表达载体; 获得重组质粒稳定转染的HepG2细胞系;检测其对HepG2细胞增殖与凋亡的影响。方法:利用PCR技术从HEV基因组中扩增出ORF3基因片断,Ecol I/BamH I双酶切后分别连接到经同样酶切的pEGFP- N2和pXF2RH真核表达载体,转化.DH5a菌株感受态细胞,获得阳性重组质粒ORF3-pEGFP和ORF3- pXF2RH。将阳性克隆用脂质体法转染HepG2细胞,G418筛选抗性克隆,在荧光显微镜下观察ORF3-
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