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[目的]近年来CuS04和ZnO在我国被广泛用作畜禽饲料添加剂,用于促进生长、减少腹泻与提高生长性能等,但在实际生产中为片面追求更好的经济效益而呈现愈演愈烈的滥用趋势,铜、锌添加量甚至分别达到500 mg/kg和3000 mg/kg以上。猪在喂饲后大部分铜、锌由粪尿中排出体外经土壤吸附、水体渗透等迁移作用势必对生态环境造成胁迫,最终由食物链传递对人类健康产生危害。[方法]本文以赤子爱胜蚓为实验动物,经室内模拟土壤环境下添加系列浓度CuS04和ZnO对胜蚓进行暴露胁迫,研究了对蚯蚓体内抗氧化酶系统(蚓体CAT、SOD、GPx、GST和MDA)的影响研究,并从RNA水平研究了CAT、SOD、热休克蛋白70 (Hsp70)和金属硫蛋白(MT)相对表达量变化。建立了以上指标在CuS04和ZnO的污染胁迫下的时间依赖和剂量依赖关系,初步评估了它们作为生物标志物指示铜、锌污染胁迫的生态毒理效应。本文运用cDNA末端快速克隆技术(RACE法)首次获得了赤子爱胜蚓的CAT和SOD基因的全长序列,并运用生物学工具对其氨基酸序列进行了分析。[结果]结果表明:(1)在CuS04的暴露胁迫下,蚯蚓体内除GST外,CAT、SOD和GPx酶等抗氧化酶均出现不同程度的时间-剂量反应关系变化;而在ZnO暴露下蚯蚓体内SOD、CAT和MT等指标变化能较好地指示土壤中ZnO污染胁迫对蚯蚓的生态毒性效应;(2)经从蛋白质水平和mRNA水平研究,MT和Hsp70可作为可靠敏感的CuS04早期分子生态毒性标志物,而SOD、CAT和MT等指标能较好地指示土壤中ZnO的污染胁迫生态毒性效应;(3) 以RACE法对蚯蚓CAT酶cDNA扩增,获得一个全长为2156bp的核苷酸序列,对蚯蚓Cu/Zn-SOD酶的cDNA扩增获得一个全长为753bp的核苷酸序列。以上两基因的全长序列的获得为今后相关生态毒理学研究提供了结构和功能关系的基础数据。[结论]从蛋白质水平和mRNA水平研究证实CuS04与ZnO暴露胁迫下对蚯蚓多种抗氧化系统产生影响;MT、Hsp70和SOD、CAT等基因表达可可作为可靠敏感的分子标志物。应对CuS04、ZnO在养殖业中大量应用对生态环境的压力引起关注。