洛克沙胂对土壤细菌nirS、nosZ、16S rDNA V3高变区基因多样性及其丰度的影响研究

来源 :中国畜牧兽医学会动物毒物学分会第十三次学术研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:bldhdh
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  [目的]洛克沙胂是在我国畜禽业被广泛使用的一种有机胂添加剂,在畜禽饲喂后经粪尿直接排放或以施肥而进入土壤和水体环境的排放量十分惊人,其给土壤质量及作物生长带来严重影响,并进威胁人类的健康。本文通过洛克沙胂对菜地土壤微生物群落多样性的影响研究,为其应用后的生态风险评估提供实际依据。[方法]本文以田间地下0~20 cm菜地土壤为研究对象,经室内阴干3d后粉碎过2 mm筛,取12份各3 kg菜地土壤在人工气候箱孵育1~2周后,成功建立了室内人工模拟土壤生态系统,分别添加三个梯度浓度的洛克沙胂(15,75和150 mg/kg,以As计,各浓度设3个重复,并设立3个空白组)进行污染暴露胁迫试验。在第1、2、3、5和8周分别采集试验土样,采用BIOLOG、DGGE、qPCR等方法研究了洛克沙胂对土壤细菌碳利用功能多样性与16SrDNA V3高变区基因多样性、反硝化细菌nirS、nosZ基因多样性及其各基因丰度的影响,通过建立菜地土壤功能多样性指数、基因多样性指数及基因丰度在洛克沙胂暴露下的时间依赖性和剂量依赖性关系,对菜地土壤微生物群落代谢多样性及细菌总量变化情况进行评价。[结果](1)洛克沙胂能降低菜地土壤微生物群落的碳源代谢功能,包括代谢强度和代谢多样性,其抑制效应随洛克沙胂暴露浓度的升高而加强,在后期抑制效应逐渐减小;(2)菜地土壤细菌16S rDNA V3可变区、反硝化细菌nirS、nosZ基因的DGGE指纹图谱分析结果显示,在洛克沙胂暴露胁迫初期,各浓度下均出现部分条带消失而另一部分条带增强变亮现象,随着洛克沙胂浓度升高,其对土壤微生物基因多样性的影响逐渐增强;(3)经qPCR实时荧光定量分析结果显示,反硝化细菌nirS、nosZ基因丰度均出现明显下降,表明洛克沙胂能明显抑制菜地土壤反硝化细菌的生长,药物浓度越高其抑制效应越明显。[结论]洛克沙胂暴露胁迫能导致土壤微生物的碳源利用能力和多样性指数降低,并呈现剂量-效应依赖性关系;土壤总细菌16S rDNA V3高变区基因和反硝化细菌nirS、nosZ基因作为土壤微生物分子标志物,结合BIOLOG技术对土壤细菌碳源利用功能多样性的监测,可为洛克沙胂环境污染胁迫的早期预警与评价提供基础理论数据。
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