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[学位论文] 作者:季朝能, 来源:复旦大学 年份:1998
该实验室从嗜热菌中克隆到了耐热碱性磷酸酯酶(FD-TAP)基因,并完成了基因的全序列测定和在大肠杆菌中的高表达.在此基础上,该论文对FD-TAP进行了多个方面的研究,主要包括五个...
[期刊论文] 作者:马兰,季朝能, 来源:生物技术通报 年份:2012
PTN作为重要的细胞因子,存在于多种生物体内,参与多种生物学过程,具有刺激细胞增殖、分化、粘附、迁移等多种功能。根据PTN的基因序列及大肠杆菌密码子的偏爱性,人工合成ptn...
[期刊论文] 作者:张洁,季朝能, 来源:遗传学报 年份:1999
采用双引物定变法,构建了以236位氨基酸为起始密码子的Taq酶的高表达质粒,并以-1移码突变质粒pFDPM118作为模板,建立了测定DNA聚合酶的体外合成精确性的Gapped-DNA系统。通过转化大肠杆菌TG1菌株皇计数X-gal平板上蓝白......
[期刊论文] 作者:季朝能,白晓阳, 来源:生物工程学报 年份:2000
通过计算机辅助分析,发现在耐热碱性磷酸酯酶(简称FD-TAP)的N端存在26个氨基酸的信号肽序列。但一般信号肽切点并非是完全专一的,所以利用基因工程手段将FD-TAP的N端分别缺失24、25、26和27个氨基酸,得到了......
[期刊论文] 作者:季朝能,姜涛, 来源:复旦学报:自然科学版 年份:2000
甲硒氨酸多波长反常散射法是国际上90年代发展的蛋白质晶体结构测定的新方法,该法得以实施的首要一步是获得硒取代(硫)的高纯蛋白质。通过亚克隆将编码耐热邻苯二酚2,3双加氧酶(简称TCTD)的......
[期刊论文] 作者:季朝能,张双全, 来源:复旦学报:自然科学版 年份:1999
林肯链霉菌林肯变种是林可霉素的产生菌,研究中发现其菌丝体中谷氨酰胺合成酶的比活力与林可霉素的生物合成存在正相关性。在此基础上,报道了GS的分离纯化,分子特征,酶学性质和活力......
[期刊论文] 作者:季朝能,孙冰, 来源:遗传学报 年份:2000
通过对耐热碱性磷酸酯酶TAPND27活性位点S(69)两侧的E(68)和S(70)的定点突变,得到了3个突变子E68S、S70A和E68SS70A。在蛋白纯化的基础上测定了3个变体的一些酶学性质,与TAPND27相比,E68S的比活力上升8倍,Tm下降了3℃,最适反应温度上升了20℃......
[期刊论文] 作者:季朝能,杜汉森, 来源:中国生物化学与分子生物学报 年份:1999
通过参U法定点突变产生了Taq DNA聚合酶N端分别缺失3个,235个,287个和443个氨基酸的4个缺失体,利用Bal-31连续缺失法产生了Taq DNA聚合酶的C端分别缺失了2个、16个、29个、32个、34个氨基酸的5个缺失体。经DNA聚合酶活性测定......
[期刊论文] 作者:王宝林,季朝能, 来源:上海医科大学学报 年份:2000
目的 对分支杆菌的一种分泌蛋白Ag85B的基因进行克隆、表达,为结核病进行诊断打下基础。方法 以结核杆菌H37Rv株基因组DNA为模板,以PCR法对基因ag85b进行扩增,产物与载体质粒pET24b构建表达Ag85B的重组质粒,将此......
[期刊论文] 作者:杜汉森,季朝能, 来源:生物工程学报 年份:1996
从水生栖热菌(Thermus aquaticus)YT-1中分离得到的Taq DNA 聚合酶是一种广泛应用于PCR的耐热DNA聚合酶。由于天然菌株酶产量较低,培养条件要求严格,酶的纯化过程极为繁...
[期刊论文] 作者:季朝能,盛小禹, 来源:复旦学报:自然科学版 年份:2000
通过分离纯化和酶学性质测定,确定耐热碱性磷酸酯酶(TAPND27)为八聚体,最适反应温度为65℃,在99℃保温30min仍保留49.4%的活性,在质量分数为5%的Tween20体系中依然有70%以上的酶活性,并且有很宽的pH稳定范围。这表明TAPND27适合......
[期刊论文] 作者:蔡在龙,季朝能, 来源:第二军医大学学报 年份:1997
构建pheB基因高表达菌株。研究酶的耐热机制。通过PCR扩增方法,对位于质粒pFDA13上pheB基因进行扩增,克隆于pUC118N和pUC119N上,经双向测序,证明PCR过程中并未发生突变,然后亚克隆于高表达载体pJLA503,转化E.cli TG1,经42℃诱导,获得了高......
[期刊论文] 作者:蔡在龙,季朝能, 来源:第二军医大学学报 年份:1996
构建xylE基因高表达菌株,为快速检测芳香类化合物污染提供可能,通过PCR扩增,将位于质粒pTG402上的xylE基因进行扩增,克隆于pUC118N和pUC119N上,经双向测序,证明PCR过程中并未发生突变,然后进一步克隆高表达载体pJLA503m,转化E.codiTG1,经42℃......
[期刊论文] 作者:李媛,张丽,陈安琪,季朝能, 来源:复旦学报:自然科学版 年份:2019
纤维素作为丰富的可再生资源,可以通过水解制取乙醇、低聚糖等多类产品,在能源与食品等领域有广泛应用,生物酶法降解因为高效环保而成为纤维素的工业应用的主要途径.内切纤维...
[期刊论文] 作者:姜涛,季朝能,盛小禹,毛裕民, 来源:遗传学报 年份:2001
用PCR随机诱变方法,研究氨基酸置换对耐热邻苯二酚2,3-双加养酶性质的影响。比较分析了突变体ro229Ser和Glu243Gly与野生型酶的酶学性质。结果显示点突变Pro229→Ser或Glu243→...
[期刊论文] 作者:陈澍,张文宏,季朝能,翁心华, 来源:中华传染病杂志 年份:2001
目的 对结核分枝杆菌H37Rv的inhA基因进行克隆、表达并纯化表达产物。方法构建含目的基因的表达质粒 pET 2 4b/inhA ,经酶切鉴定和测序检验后转化大肠杆菌BL2 1(DE3) ,然后...
[期刊论文] 作者:邹先琼, 陈春靖, 季朝能, 毛裕民,, 来源:生命的化学 年份:2005
近年来在多种蛋白质结构中发现一个特定的结构域,假激酶结构域。假激酶结构域由于缺少一些对于激酶催化活性绝对必要的氨基酸残基而不具有激酶催化活性。以往同源建模的结果...
[期刊论文] 作者:苏琢磊,楼田甜,王远东,季朝能, 来源:生物技术通报 年份:2014
hASH4蛋白所属的HLH转录因子家族在调节基因表达,调控细胞周期,决定细胞分化中起了重要作用。有研究表明hASH4蛋白可能与皮肤的分化发育有着密切的关系,但具体机制不明。成功构......
[期刊论文] 作者:季朝能,盛小禹,姜涛,金,毛裕民, 来源:中国生物化学与分子生物学报 年份:2001
为了确定耐热碱性磷酸酯酶(TAPND27)发挥活性所必需的功能结构城,通过PCR介导的诱变缺失,得到了N端分别缺失8、16、25个氨基酸的3个缺失体pTAPN8、pTAPN16和pTAPN25以及C端分...
[期刊论文] 作者:郑佐华,季朝能,盛小禹,毛裕民, 来源:云南大学学报:自然科学版 年份:1999
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