耐热碱性磷酸酯酶的功能结构域的定位

来源 :中国生物化学与分子生物学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：qiyesoft

【摘要】

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为了确定耐热碱性磷酸酯酶(TAPND27)发挥活性所必需的功能结构城,通过PCR介导的诱变缺失,得到了N端分别缺失8、16、25个氨基酸的3个缺失体pTAPN8、pTAPN16和pTAPN25以及C端分

【作者】

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季朝能盛小禹姜涛金 毛裕民

【机构】

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复旦大学生命科学学院遗传所

【出处】

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中国生物化学与分子生物学报

【发表日期】

：

2001年1期

【关键词】

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耐热碱性磷酸酯酶功能结构域定位热稳定性 thermostable alkaline phosphatase functional domain locat

【基金项目】

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国家自然科学基金

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为了确定耐热碱性磷酸酯酶(TAPND27)发挥活性所必需的功能结构城,通过PCR介导的诱变缺失,得到了N端分别缺失8、16、25个氨基酸的3个缺失体pTAPN8、pTAPN16和pTAPN25以及C端分别缺失10和30个氨基酸的两个缺失体pTAPC10和pTAPC30.经表达和活性测定,发现pTAPN8和TAPC10保持了较高的活性而其余3个缺失体则失去酶活性.据此,TAPND27的活性区域被定位在8～465氨基酸之间.在分离纯化的基础上测定了一些酶学性质.发现TAPN8和TAPC10的比活没有大的改变,

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