【摘 要】
：
为了研制A型塞内卡病毒(Senecavirus A,SVA)的病毒样颗粒(Virus-like particles,VLPs)疫苗,以SVA田间流行毒株CH-FJ-2017结构蛋白基因序列为研究对象,构建了能够同时表达SVA的3种结构蛋白VP0、VP1和VP3的单个原核重组表达质粒pET28a-SVA-VP031.通过大肠杆菌Escherichia coli表达、亲和层析纯化和体外自组装,获得SVA VLPs.透射电子显微镜鉴定显示,SVA的3种结构蛋白在体外能够自组装成直径约25-30 nm的VLPs,
【机 构】
：
中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室OIE/国家口蹄疫参考实验室,甘肃兰州 730046
论文部分内容阅读
为了研制A型塞内卡病毒(Senecavirus A,SVA)的病毒样颗粒(Virus-like particles,VLPs)疫苗,以SVA田间流行毒株CH-FJ-2017结构蛋白基因序列为研究对象,构建了能够同时表达SVA的3种结构蛋白VP0、VP1和VP3的单个原核重组表达质粒pET28a-SVA-VP031.通过大肠杆菌Escherichia coli表达、亲和层析纯化和体外自组装,获得SVA VLPs.透射电子显微镜鉴定显示,SVA的3种结构蛋白在体外能够自组装成直径约25-30 nm的VLPs,并且动物免疫试验结果表明,该VLPs能够有效刺激豚鼠产生高水平的抗原特异性中和抗体.上述研究结果为SVA VLPs疫苗的研制奠定了基础.
其他文献
铰链结构,又称铰链区或转角,是部分抗菌肽序列中存在的一种特殊结构.但目前抗菌肽结构的研究多集中于标准的α-螺旋和β-折叠二级结构,对于铰链结构及其作用总结较少.铰链结构对抗菌肽生物活性有重要影响,主要原因是铰链结构能够提高抗菌肽的结构灵活性,促进其对细菌细胞膜的破坏作用或与胞内作用靶点的结合效率,进而提高抗菌肽的抗菌活性.同时,降低的抗菌肽结构刚性,消减了抗菌肽对真核细胞的毒性.文中结合了笔者课题组相关工作,就铰链结构特点、对抗菌肽生物活性的影响以及在抗菌肽分子设计方面的应用进行了综述,以期为新型抗菌肽的
病毒性心肌炎(Viral myocarditis,VMC)是一种由病毒感染所引起的以心肌细胞炎症为特征的疾病.由于病毒性心肌炎的发病机制尚未完全研究清楚,因此该病的诊断及治疗对于临床医生来说仍具有极大的挑战性.非编码RNAs (Non-coding RNAs,ncRNAs)是一类不具有编码蛋白质功能的RNA,越来越多的研究表明ncRNAs参与到调控VMC的发生和发展过程中,这可能成为VMC的治疗或诊断的新研究靶点.文中对近3年来关于ncRNAs在VMC的发病机制及诊断中可能发挥的作用进行了综述.
近年来,基于成簇的规律间隔短回文重复序列及其相关系统(Clustered regularly interspaced short palindromic repeats/CRISPR-associated protein,CRISPR/Cas)的基因编辑技术飞速发展,该系统可以利用同源定向重组(Homology directed repair,HDR)来完成其介导的精准编辑,但效率极低,限制了其在农业和生物医学等领域上的推广应用.基于CRISPR/Cas系统的DNA碱基编辑技术作为一种新兴的基因组编辑技术
《东京家族》翻拍自小津安二郎导演60年前的经典名作《东京物语》。在原有的剧情上略作改编，加入之前重创日本的“3·11”大海啸情节，紧贴着时代的脉动，看来特别真切。但《东京家族》的过程与结局更残酷一些，似乎在提醒我们不断流逝的时光中只有无常不会消失，当它毫无预警地出现在眼前，即便再难接受，人生还要继续。 何为家庭和家族 电影的开始，老夫妇开心地到东京探望子女。起初，老夫妇也确实受到子女们热烈欢迎
单增李斯特菌是一种重要的食源性病原菌.单增李斯特菌的分布和存活与其形成生物膜的能力有关,生物膜对逆性环境有抵抗力,细菌会从生物膜中分离导致食品持续性的污染.生物膜的形成、成熟和结构取决于多种外部和内部因素,并且多种调控机制起着重要作用.文中旨在阐述单增李斯特菌生物膜形成过程中的调控机制(包括胞内作用、胞间作用和种间作用),以控制食品加工环境中致病性生物膜的形成,从而为食品安全提供新的干预策略.
发酵TMR是根据家畜不同生长阶段的营养需要和饲料原料的营养价值,设计科学合理的日粮配方,经过乳酸菌发酵调制而成的一种营养平衡的日粮.随着我国畜牧业的快速发展,对高品质饲料的需求量越来越大.为了降低对饲料粮的过度依赖,非常规饲料资源的开发利用显得尤为重要.发酵TMR调制加工技术的推广和普及能够有效利用非常规饲料资源,缓解饲料资源短缺制约我国畜牧业稳定发展的难题.而发酵TMR微生物种群多样性对饲料的发酵品质及有氧稳定性都有重要作用.因此,文章从发酵TMR技术的应用、有氧稳定性的微生物影响因素以及发酵TMR中的
蓝舌病毒(Bluetongue virus,BTV)作为由媒介昆虫库蠓传播的引起反刍动物蓝舌病(Bluetongue,BT)的病原微生物,同时也是研究无囊膜病毒(Non-enveloped virus)释放机制的经典模型.文中以BTV侵染细胞及组装为始,对BTV诱导细胞自噬并通过多囊泡体以细胞外囊泡形式释放、BTV诱导细胞凋亡而裂解释放、BTV从质膜出芽释放的不同途径以及BTV关键非结构蛋白NS3在调控BTV释放过程中作用机制的研究进展进行综述,为进一步了解BTV感染、增殖、释放的分子机制提供参考.
脱氧核糖核酸(Deoxyribonucleic acid,DNA)不仅可作为生物遗传的物质基础,又以其可编程性、功能多样性、生物相容性和生物可降解性等优点,在生物材料的构建方面表现出巨大的潜力.DNA水凝胶是一种主要由DNA参与形成的三维网状聚合物材料,同时因其保留的DNA生物性能与自身骨架的机械性能的完美融合使得它成为近年来最受关注的新兴功能高分子材料之一.目前,基于各种功能核酸序列或通过结合不同的功能材料制备的单组分或多组分DNA水凝胶,已广泛用于生物医学、分子检测及环境保护的研究或应用领域中.文中主
木质素高值转化对于提升生物炼制经济性,促进社会经济绿色发展具有重要意义.然而,木质素结构复杂且不均一,其高值化利用仍存在技术壁垒,使得木质素应用尚未形成规模.文中首先综述了当前生物炼制过程中木质素高值转化面临的主要挑战.然后通过比较不同预处理技术对木质素分离、性质及其利用的主要影响,详细阐述了基于生物炼制理念发展的新型组合预处理技术.其次,针对木质素本征结构特性导致其利用效率低等问题,进一步详述了溶剂分级、膜分级、梯度沉淀分级等分级利用策略对克服木质素不均一性,改善其可加工性能的重要影响.再次,针对木质素
微生物重组表达胶原蛋白来源清洁,同时具有序列设计灵活和高产量高纯度等优点,作为生物材料在组织工程等领域具有广泛的应用前景.然而如何促进重组胶原分子交联,使其形成更加稳定的空间结构是设计重组胶原纳米材料需要克服的难点.文中通过双质粒系统将非天然氨基酸O-(2-溴乙基)-酪氨酸引入细菌胶原蛋白序列中,并对其发酵条件进行优化,结果表明在25℃下,以终浓度为0.5 mmol/L的IPTG和0.06％的阿拉伯糖诱导24 h可以获得高纯度含非天然氨基酸的胶原蛋白.将含非天然氨基酸的胶原蛋白与含半胱氨酸的胶原蛋白在pH