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目的构建Livin shRNA真核表达载体,获得干扰质粒稳定转染的宫颈癌siha细胞系。方法合成Livin基因干扰序列并定向插入到RNA干扰(RNAi)真核表达载体pGenesil-1质粒,通过测序进行鉴定。干扰质粒经脂质体Lipofectamine 2000介导转染siha细胞,经G418持续压力选择和有限稀释法获得稳定转染的细胞系。RT-PCR检测所筛选克隆Livin mRNA的转录水平。结果测序证明Livin干扰序列及读码框完全正确,干扰质粒稳定转染的siha细胞在倒置荧光显微镜下呈明亮绿色荧光。R