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目的研究AFP 5′端3.1kb启动子序列对GFP在人肝癌细胞中表达的影响.方法首先采用重组DNA技术,构建了由AFP5′端前导序列(AFP启动子+AFP EI增强子,3.1 kb)调控的绿色荧光蛋白(GFP)报告基因哺乳动物表达载体pcDNA3-GFP-AFP-w,然后将pcDNA3GFP-AFP-w、pcDNA3-GFP及空载(pcDNA3-neo)经lipofectin分别转染Be17402、Hela二种肿瘤细胞,G418抗性筛选得到含各不同质粒的稳定阳性细胞克隆,Western blotting和