目的建立液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)测定人尿中乳果糖、甘露醇和乳糖含量。方法尿样用水和乙腈直接稀释后,以LunaNH2(100×2.0mm,5μm)为分析柱,乙腈-水(80∶20,v/v)为流动相,0.3mL/min流速进行色谱分离。采用负离子化电喷雾、多反应监测(MRM)扫描方式进行质谱定量分析,离子通道选择m/z为:甘露醇181.1/88.9,乳果糖和乳糖341.3/160.9,内标353.4/166.9。结果甘露醇、乳果糖、乳糖和内标的保留时间分别为2.9、4.1、4.7和4.7min。在0.1～40μg/mL浓度范围内线性关系良好(r≥0.9980)。最低定量限分别为0.1μg/mL(甘露醇、乳果糖)和0.2μg/mL(乳糖)。日内、日间精密度(CV%)分别为0.60%～4.31%、2.55%～7.71%,准确度分别为86.4%～107.6%、95.9%～102.9%。回收率为84.7%～105.5%。结论该方法的样品处理简单快速,检测专一灵敏、准确可靠,可用于肠通透性评价中甘露醇及乳果糖的含量测定。