角毛壳菌几丁质酶基因chi58多点突变及在毕赤酵母中的高效表达

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应用重叠延伸PCR技术(gene splicing by overlap extension PCR,gene SOEing),简称SOE—PCR对角毛壳菌(Chaetomium cupreum)的几丁质酶基因chi58进行多点突变。依据毕赤酵母密码子偏爱性,将毕赤酵母中编码Arg使用频率几乎为0的密码子CGC突变为使用频率高的AGA,构建了含有正确突变的酵母表达载体pPIC9K—chi58A,电转化毕赤酵母GS115,获得的重组酵母株在诱导120h酶活力最高,平均可达101.71U/mL±3.
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