非酒精性脂肪性肝炎大鼠肝细胞和库普弗细胞同时分离及鉴定

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目的 建立一种稳定、高效、同时分离非酒精性脂肪性肝炎(nonalcohlic steatohepatitis,NASH)大鼠肝细胞(hepatocytes,HCs)和库普弗细胞(Kupffer cells,KCs)的新方法.方法 采用离体循环灌注Ⅳ型胶原酶,低速离心获取HCs;差速离心、密度梯度离心和选择性贴壁获得KCs.用Typan blue染色和流式细胞术(FCM)分别进行活性和纯度鉴定.结果 每只大鼠获得纯化的HCs[(4.0~4.5)×108]、KCs[(1.5~2.0)×107],经Typan blue染色活力均在95%以上,FCM检测纯度均在90%以上.结论 此实验建立同时分离NASH大鼠HCs和KCs的方法高效、稳定,细胞数量和纯度都符合进一步实验的要求.
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