【摘 要】
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目的 :研究甘油二酯激酶(diacylglycerol kinase,DGK)对Hedgehog信号通路的调控机制。方法:蛋白质免疫共沉淀实验分析DGK蛋白与IFT88的结合情况;si RNA敲低DGK后,检测Hedgeho
【基金项目】
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国家自然科学基金面上项目(81171962)
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目的 :研究甘油二酯激酶(diacylglycerol kinase,DGK)对Hedgehog信号通路的调控机制。方法:蛋白质免疫共沉淀实验分析DGK蛋白与IFT88的结合情况;si RNA敲低DGK后,检测Hedgehog信号通路靶基因Gli1蛋白及m RNA的表达水平;激光共聚焦显微镜分析DGK缺失对原纤毛生长和IFT88蛋白在原纤毛内定位的影响。结果:DGK家族的7个成员都可以和IFT88发生特异性结合;si RNA敲低DGK后,通路靶基因Gli1的转录水平明显下降;DGK蛋白对于通路的调控部位介于Ptch1和Smo之间;DGKδ的缺失会抑制原纤毛的生长以及IFT88在原纤毛中的分布。结论:DGK的敲低影响了IFT88向原纤毛的运输,从而影响了原纤毛的结构和纤毛内转运的正常进行,DGK影响Hedgehog信号通路的正常转导及其活性,可能与其抑制原纤毛的生长有关。
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