【摘 要】
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目的合成并鉴定人参皂苷Re(GRe)人工抗原,用于单克隆抗体的制备。方法采用高碘酸钠氧化法合成人参皂苷Re人工免疫抗原(GRe-BSA)和人工包被原(GRe-OVA);利用薄层色谱法及紫外
【机 构】
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北京中医药大学基础医学院,北京中医药大学“经典方剂的应用基础研究”创新团队,北京中医药大学科研实验中心,北京中医药大学中药学院,
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目的合成并鉴定人参皂苷Re(GRe)人工抗原,用于单克隆抗体的制备。方法采用高碘酸钠氧化法合成人参皂苷Re人工免疫抗原(GRe-BSA)和人工包被原(GRe-OVA);利用薄层色谱法及紫外光谱法鉴定人参皂苷Re人工免疫抗原和人参皂苷Re人工包被原;利用人参皂苷Re人工免疫抗原多次免疫BALB/c小鼠后,通过间接ELISA法测定免疫小鼠抗血清的效价和特异性。采用PEG法诱导小鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞SP2/0融合,有限稀释法进行单克隆细胞株的筛选。结果紫外光谱和薄层色谱法检测结果表明,人参皂苷Re与BSA/OVA偶联成功;小鼠抗血清效价大于1∶60 000,竞争抑制曲线表明,血清中的抗人参皂苷Re抗体可与人参皂苷Re产生特异性结合。有限稀释法筛选出能分泌抗人参皂苷Re抗体的单克隆细胞株2F4-3H10。结论成功合成了人参皂苷Re人工免疫抗原和人参皂苷Re人工包被原,并可诱发小鼠产生相应特异性抗体;筛选出了人参皂苷Re单克隆细胞株,可用于腹水的大量制备及免疫组化技术的建立。
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