pTARGET-TCR Vβ5．2真核表达质粒的构建及表达

来源 :免疫学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户：wuzhenlikk

【摘要】

：

目的构建含大鼠TCR Vβ5．2基因的重组真核表达质粒。方法以RT-PCR法扩增Lewis大鼠脾脏淋巴细胞的TCR Vβ5．2基因片段，将目的基因直接克隆到真核表达载体pTARGET中，构建重组质粒pT

【作者】

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马丽平李蕴赵文明刘振龙

【机构】

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首都医科大学免疫学系

【出处】

：

免疫学杂志

【发表日期】

：

2007年1期

【关键词】

：

T细胞受体真核表达载体胶原诱导性关节炎 T cell receptor Eukaryotic expression vector Collagen-in

【基金项目】

：

北京市自然科学基金项目（7052011）和北京市教委科技发展计划基金项目（2002KJ085）资助

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目的构建含大鼠TCR Vβ5．2基因的重组真核表达质粒。方法以RT-PCR法扩增Lewis大鼠脾脏淋巴细胞的TCR Vβ5．2基因片段，将目的基因直接克隆到真核表达载体pTARGET中，构建重组质粒pTARGET-TCR Vβ5．2。连接产物转化E．coli JM109细胞后进行蓝白斑筛选，并经菌落PCR和DNA测序进行鉴定。将重组质粒以肌注法免疫Balb／c小鼠，用RT-PCR和免疫组化方法分别检测重组质粒在注射部位的转录和表达。通过脂质体介导，将重组质粒转染COS-7细胞进行瞬时表达，用免疫细胞化学染

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