【摘 要】
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目的以鸡胚高度适应株A/PR/8/34株为重组流感病毒骨架,利用反向遗传技术拯救冷适应致弱的重组A型人流感病毒。方法对冷适应、温度敏感、减毒的A/Ann Arbor/6/60（H2N2）流感病毒
【机 构】
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军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室,扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室
【基金项目】
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国家科技攻关项目（2004BA519A70）资助
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目的以鸡胚高度适应株A/PR/8/34株为重组流感病毒骨架,利用反向遗传技术拯救冷适应致弱的重组A型人流感病毒。方法对冷适应、温度敏感、减毒的A/Ann Arbor/6/60（H2N2）流感病毒株的PB2基因片段,进行了全基因序列合成,同时人工引入PB2265（N265S）氨基酸的突变。PB2基因片段通过与改造后的转录/表达载体pAD3000连接,构建PB2基因的拯救载体。该重组质粒与PR8进行“7＋1”组合的病毒拯救,共转染COS-1细胞。结果经测序获得序列准确的拯救质粒pMDV-A-PB2,利用反向遗
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