转录因子Blimp-1的原核表达、纯化及抗体制备

来源 :第三军医大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：zbc518

【摘要】

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目的获得Blimp-1纯化蛋白，制备多克隆抗体，为研究浆细胞发育的调控奠定基础。方法采用PCR方法从Blimp-1质粒中克隆Blimp-1编码前350个氨基酸的基因片段，构建Blimp-1与6个His的融

【作者】

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邓少丽胡福泉蹇锐饶贤才蒋静程小星

【机构】

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第三军医大学基础医学部微生物学教研室、重庆市微生物工程实验室

【出处】

：

第三军医大学学报

【发表日期】

：

2006年3期

【关键词】

：

BLIMP-1 原核表达抗体制备 Blimp-1 prokaryotic expression antibody preparation

【基金项目】

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国家自然科学基金资助项目（30370603）

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目的获得Blimp-1纯化蛋白，制备多克隆抗体，为研究浆细胞发育的调控奠定基础。方法采用PCR方法从Blimp-1质粒中克隆Blimp-1编码前350个氨基酸的基因片段，构建Blimp-1与6个His的融合蛋白原核表达质粒，进行原核表达与蛋白纯化后，免疫动物，制备Blimp-1多抗。采用ELISA方法检测其效价，Western检验抗体特异性及在骨髓瘤细胞株中的表达。结果构建了表达Blimp-1前350个氨基酸的原核表达质粒PQE-Blimp-1，经过大肠杆菌表达、镍亲和层析柱纯化，得到分子量约46

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