肺外结核感染的快速分子检测和菌株分型方法的应用

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目的

应用结核分枝杆菌rRNA直接检测(MTD)和多位点PCR菌株分型方法,检测肺外结核标本中的结核分枝杆菌,评价其在肺外结核感染的快速检测和菌株分型中的应用价值。

方法

回顾性分析2010年6月至2011年12月上海市公共卫生临床中心47例儿童肺外结核、75例成人肺外结核以及48例非结核病患者的脑脊髓液、穿刺液等标本。用涂片法、L-J固体培养法、MGIT960液体培养法和MTD法进行平行检测,对培养阳性菌株应用MPT64胶体金初筛。MPT64阴性菌株采用多位点PCR菌株分型方法进行快速分型,并用化学法确认。采用SPSS16.0进行统计分析。

结果

涂片法、L-J固体培养法、MGIT960液体培养法和MTD法检测肺外结核的敏感度依次为:10.7%(13/122),11.5%(14/122),16.4%(20/122)和37.7%(46/122),特异度均为100.0%。20株培养阳性的菌株,其中6例儿童患者临床分离菌株为MPT64胶体金检测阴性,经多位点PCR菌株分型方法、化学法分型鉴定为卡介苗菌株。多位点PCR菌株分型方法与传统化学法结果一致,但可在4 h内完成检测。

结论

与传统病原学检测方法比较,MTD法检测结核分枝杆菌快速简便,结果灵敏可靠;同时应用多位点PCR菌株分型方法,可对儿童肺外结核患者进行快速的早期鉴别诊断。(中华检验医学杂志,2013,36:620-624)

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