新城疫病毒血凝素-神经氨酸酶蛋白的可溶性超表达与免疫活性检测

来源 :解剖学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:loyovue0603
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的检测新城疫病毒(NDV)血凝素-神经氨酸酶(HN)蛋白在大肠杆菌中的可溶性表达量,及其免疫活性。方法采用融合表达的方法将HN蛋白基因分别与Grifin、谷胱甘肽S移酶(GST)、麦芽糖结合蛋白(MBP)、Nus A、小泛素样相关修饰物(SUMO)、硫氧还蛋白(thioredoxin)、蛋白G(protein G)、γ-晶状体蛋白(γ-crystallin)、Ars C、Ppi B 10种融合标签基因采用柔性接头进行连接,构建10个重组表达质粒,经酶切及测序鉴定正确后,将这10个重组质粒分别转入大肠杆菌BL21中,用不同条件进行诱导表达,经SDS-PAGE检测并选出最佳诱导蛋白表达的条件,筛选出能够显著促进HN蛋白可溶性表达的标签,并用Western blotting对所表达蛋白的含量进行定性分析,同时纯化的重组蛋白用Western blotting和间接ELISA验证其免疫原性。结果成功构建了10个不同融合标签的HN融合蛋白表达载体,筛选出融合标签麦芽糖结合蛋白(MBP)能够显著促进HN蛋白可溶性表达,且Western blotting显示所表达重组蛋白的表达量是最多的。经Western blotting和间接ELISA验证重组HN蛋白具有良好的免疫原性。结论融合标签MBP可以显著提高HN蛋白在大肠杆菌中的可溶性表达量。
其他文献
我们通常所说的“新闻真实”实际上包括了法律意义上的真实和道义意义上的真实双重含义。法律意义上的真实,就是说新闻所报道的事实必须经得起法律程序的检验。操作时,“不能
福建泉州南音(弦管)于2009年10月入选联合国教科文组织公布的第四批人类非物质文化遗产代表作名录,这标志着南音进入全人类的音乐文化视野之内,显示了南音这古老的音乐文化瑰
对高层管理型人力资本的相关问题进行介绍,阐述国内管理型人力资本激励的具体情况与相关问题,并提出创建符合我国国情的管理型人力资本激励体制。 Introduce the related pr
本文结合作者在过去20年内担任9种国内和3种英美国家医学期刊编委或审稿人员的经验,分析了目前国内和英美国家学术刊物的差异.认为国内学术刊物在论文写作方式、编辑过程及论
目的探讨子宫肌瘤行腹腔镜子宫肌瘤剥除术治疗的临床效果。方法选择50例2016年1月~2018年1月子宫肌瘤患者据术式分组。对照组开展传统手术治疗,观察组行腹腔镜子宫肌瘤剥除术
政治文化和新闻传播都属于上层建筑的范畴,新闻传播总是要受到一定社会政治文化制约,并进而受到其影响.政治文化包括人们的政治认知、政治情感、政治信仰、政治价值观、政治
<正>生物农药是指利用生物活体或其代谢产物对害虫、病菌、杂草、线虫、鼠类等有害生物进行防治的一类农药制剂,或者是通过仿生合成具有特异作用的农药制剂。关于生物农药的
推进全面依法治国,必须高度重视青年法治人才培养。我们要切实加强中国特色法学学科体系建设,坚持理论和实践相结合、法治和德治相结合、博学和专攻相结合、自律和他律相结合
本文从地质资料管理制度标准体系建设,地质资料管理基础条件完善,地质资料管理信息化建设,馆藏地质资料资源建设,以及地质资料利用服务等方面系统分析总结了中国石化“十二五