【摘 要】
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目的:探讨甲基化转移酶样蛋白3（METTL3）对颞下颌关节骨关节炎（TMJOA）巨噬细胞NLRP3炎性小体和焦亡的调控效应。方法:将16只雄性SD大鼠随机分为对照组和TMJOA模型组。采用H＆E染色、阿利新蓝染色和番红固绿染色观察关节软骨组织关节炎情况，并进行Mankin’s和骨关节炎软骨损伤分级（OARSI）评分。采用脂多糖（LPS）联合腺嘌呤核苷三磷酸（ATP）诱导巨噬细胞RAW264.7以构
【机 构】
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电子科技大学附属医院//四川省人民医院口腔科
【基金项目】
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国家自然科学基金青年项目（32000928）； 四川省科技厅重点研发计划项目（2022YFS0290）； 四川省人民医院青年人才基金项目（2018QN01）；
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目的:探讨甲基化转移酶样蛋白3（METTL3）对颞下颌关节骨关节炎（TMJOA）巨噬细胞NLRP3炎性小体和焦亡的调控效应。方法:将16只雄性SD大鼠随机分为对照组和TMJOA模型组。采用H＆E染色、阿利新蓝染色和番红固绿染色观察关节软骨组织关节炎情况，并进行Mankin’s和骨关节炎软骨损伤分级（OARSI）评分。采用脂多糖（LPS）联合腺嘌呤核苷三磷酸（ATP）诱导巨噬细胞RAW264.7以构建焦亡细胞模型，被转染METTL3过表达质粒和小干扰RNAs（siRNAs）。酶联免疫吸附测定（ELISA）检测颞下颌关节滑液或RAW264.7细胞培养基中乳酸脱氢酶（LDH）的活性；免疫印迹检测滑液巨噬细胞或RAW264.7中METTL3,NLRP3炎性小体和焦亡相关蛋白，IκBα和p65磷酸化水平。结果:在体内实验中，与对照组比较，TMJOA模型组大鼠出现关节软骨组织损伤，Mankin’s评分和OARSI评分升高；大鼠颞下颌关节滑液中乳酸脱氢酶（LDH）活性增强；颞下颌关节滑液巨噬细胞中METTL3,NLRP3炎性小体和焦亡相关蛋白表达水平增加。在体外实验中，METTL3过表达显著协同LPS联合ATP诱导的RAW264.7细胞NLRP3炎性小体形成和细胞焦亡，增强LDH活性，并激活IκBα和p65磷酸化；然而，通过转染siRNAs敲低METTL3表达能够显著抑制LPS联合ATP诱导的RAW264.7细胞NLRP3炎性小体形成和细胞焦亡，抑制LDH活性，减少IκBα和p65磷酸化水平。结论:METTL3沉默可通过拮抗NF-κB信号通路抑制NLRP3炎性小体和焦亡改善TMJOA软骨损伤。
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