【摘 要】
：
背景与目的:作为调节细胞周期的蛋白激酶,polo样激酶4(polo-like kinase 4,PLK4)参与有丝分裂启动、中心体成熟、胞质分裂及DNA损伤检测等,在多种肿瘤中呈高表达,但PLK4是否参与食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)的增殖和侵袭迁移尚不清楚.研究PLK4在ESCC细胞系和临床组织标本中的表达以及对癌细胞增殖、侵袭迁移的影响.方法:采用TRIzol提取细胞总RNA,反转录试剂盒合成cDNA,采用实时荧光定量聚合酶链反应(re
【机 构】
：
河南医学高等专科学校检验系,河南 郑州 451191;郑州大学医学院临床医学系,河南 郑州 450000
论文部分内容阅读
背景与目的:作为调节细胞周期的蛋白激酶,polo样激酶4(polo-like kinase 4,PLK4)参与有丝分裂启动、中心体成熟、胞质分裂及DNA损伤检测等,在多种肿瘤中呈高表达,但PLK4是否参与食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)的增殖和侵袭迁移尚不清楚.研究PLK4在ESCC细胞系和临床组织标本中的表达以及对癌细胞增殖、侵袭迁移的影响.方法:采用TRIzol提取细胞总RNA,反转录试剂盒合成cDNA,采用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescent quantitative polymerase chain reaction,RTFQ-PCR)检测PLK4基因在正常食管上皮细胞Het-1A和ESCC细胞系TE-1、TE-8和TE-13中的mRNA表达水平.离心收集细胞后用RIPA裂解液提取细胞总蛋白,采用蛋白质印迹法(Western blot)检测正常食管上皮细胞Het-1A和ESCC细胞系TE-1、TE-8和TE-13中PLK4蛋白水平.选取2017年1月—2019年12月河南医学高等专科学校附属医院93例经病理组织学检查确诊为ESCC的患者癌组织及其配对的癌旁组织(距原发灶边缘5 cm以上),临床组织用液氮速冻后加入RIPA裂解液研磨提取组织总蛋白,采用Western blot检测PLK4蛋白水平.绘制受试者工作特征曲线,分析PLK4表达与临床病理学参数之间的关系.利用siRNA干扰技术抑制TE-13细胞中PLK4的表达,设计并合成PLK4的siRNA干扰片段,采用LipofectamineTM2000转染细胞抑制PLK4在TE-13细胞中的表达,RTFQ-PCR实验和Western blot检测siRNA干扰片段对PLK表达的影响.PLK4在TE-13细胞中表达下调后,用细胞计数试剂盒-8(cell counting kit-8,CCK-8)实验和克隆形成实验检测细胞的增殖能力,transwell小室实验检测细胞的侵袭能力,划痕愈合实验检测细胞的迁移能力.Western blot实验检测PLK4下调后对mTOR/p70S6K信号转导通路中关键蛋白mTOR、p70S6K、p-mTORSer2448和p-p70S6KThr421/Ser424表达的影响.结果:RTFQ-PCR和Western blot检测结果显示,PLK4基因在ESCC细胞系中的mRNA和蛋白表达水平显著高于正常食管上皮细胞(P<0.05).与癌旁正常组织相比,ESCC组织标本中PLK4的蛋白表达水平异常增高(P<0.05),绘制的受试者工作特征曲线的曲线下面积为0.841,95％CI为0.786～0.895,灵敏度为74.2％(69/93),特异度为89.2％(83/93)(P0.05),但与分化程度、临床分期和淋巴结是否转移有关(均P<0.05).ESCC分化程度越低,PLK4高表达率越高,低分化程度的ESCC组织中PLK4高表达率为86.7％,Ⅲ～Ⅳ期患者ESCC组织中PLK4蛋白高表达率为92.3％.PLK4高表达与临床分期呈正相关(P<0.05).CCK-8和克隆形成实验结果显示,下调PLK4的表达可以显著抑制TE-13细胞的增殖(P<0.05),transwell小室实验和划痕实验结果显示,下调PLK4的表达可以显著抑制TE-13细胞的侵袭迁移能力(P<0.05).抑制PLK4的表达使TE-13细胞中mTOR和p70S6K蛋白的表达下降(P<0.05),且p-mTORSer2448和p-p70S6KThr421/Ser424的表达下降?(P<0.05).结论:PLK4在ESCC细胞和组织中均呈高表达,抑制PLK4的表达可以抑制ESCC细胞的增殖和侵袭迁移能力,PLK4可能通过mTOR/p70S6K信号转导通路促进ESCC细胞恶性进程.
其他文献
甲状腺癌(TC)诊断多采用超声检查,通过观察肿块边缘、内部回声及钙化情况,以明确肿块良恶性,为临床治疗提供参考.目前,超声技术类型丰富,包括二维灰阶超声、超生造影等,但各技术单一应用存在不足,可能会出现漏诊、误诊情况.多模式超声是将多种超声技术联合使用,目前已应用于软组织肿物、乳腺癌等鉴别诊断中,且已证实有一定应用价值.因此明确TC患者多模式超声诊断应用情况及价值,不仅可为未来TC患者选择诊断方法提供参考,同时也可为多模式超声诊断技术的应用提供依据.
1 编写过程rn麻醉药品和第一类精神药品(以下简称“麻精药品”)是我国依法依规实行特殊管理的药品,其具有两重性,一方面有很强的镇痛镇静等作用,是临床诊疗必不可少的药品;另一方面不规范地连续使用易产生依赖性,若流入非法渠道则会造成严重的社会危害甚至违法犯罪.根据《国家卫生健康委办公厅关于加强医疗机构麻醉药品和第一类精神药品管理的通知》要求,医疗机构应提高麻精药品信息化管理水平,以实现麻精药品来源可查、去向可追、责任可究的全程闭环式可追溯管理体系.基于此,中国抗癌协会肿瘤临床药学专业委员会牵头编写此共识,旨在
目的 探讨腹腔镜下肝门暴露技术在不同年龄婴儿胆道闭锁中的应用及其对患儿预后的影响.方法 选择2012年1月至2020年3月淮安市妇幼保健院收治的胆道闭锁患儿66例,按年龄不同分为30～60 d组(20例)、>60～90 d组(28例)、>90～120 d组(18例).患儿均采用腹腔镜下肝门肠吻合术治疗,术中充分暴露肝门.比较三组患儿手术相关情况,肝纤维化程度及胆管反应程度,术后随访6个月,比较总胆红素水平和黄疸消退率.结果 三组手术成功率、手术时间、术中出血量及并发症发生率比较差异无统计学意义(P>0.0
目的 临床药师对胆总管结石伴急性胆管炎患者的抗感染用药进行药学监护,以期促进临床合理用药.方法 依照患者病情、实验室指标、指南等对初始抗感染方案进行评估;感染控制欠佳时,临床药师结合病原学及药敏结果、指南、相关循证学依据等,协助临床医师选择新的抗感染方案.结果 患者体温恢复正常,相关指标正常,表明抗感染治疗有效.结论 临床药师在抗感染治疗中能够发挥重要作用.
目的 探讨癌痛方正丁醇提取物(BTE)对Lewis肺癌小鼠肿瘤细胞凋亡、增殖及降钙素基因相关肽(CGRP)/磷酸化环磷腺苷效应元件结合蛋白(p-CREB)信号通路的影响.方法 以皮下注射肿瘤细胞的方法建立C57BL/6小鼠Lewis肺癌模型,共20只,随机分为模型对照组及BTE组,每组10只.模型对照组给予0.9％氯化钠溶液灌胃,BTE组给予BTE1.97 g·kg-1·d-1灌胃,连续14 d,处死动物,剥离肿瘤组织.检测两组肿瘤质量、体积改变,苏木精-伊红(HE)染色法分析肿瘤组织形态改变,免疫荧光法
目的 探讨脑震宁方对模型大鼠脑组织神经元的保护作用.方法 通过金属单摆闭合性击打方式,建立脑震荡模型,造模成功的大鼠随机分为模型对照组(给予等体积纯化水)、吡拉西坦组(0.324 g·kg-1)和脑震宁小、中、大剂量组(2.5,5.0,10.0 g·kg-1),每组10只,并设10只正常大鼠作为正常对照组(给予等体积纯化水).各组大鼠分别按10 mL·kg-1灌胃给药,每天1次,连续21 d.采用Weil氏染色和甲苯胺蓝染色检测大脑神经髓鞘和尼氏体结构改变,免疫组化法检测大脑诱导型一氧化氮合成酶(iNOS
哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)能感受外界各种信号(如缺氧、应激、营养素等),调节机体代谢(包括细胞的生长、存活等),影响生物功能.该文综述了mTOR抑制药雷帕霉素在癌症、代谢、寿命等方面的药理作用,为其临床应用提供参考.
目的 评估指南推荐疗法治疗严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2)和其他β冠状病毒相关呼吸道疾病的安全性.方法 系统检索PubMed、Embase、Web of Science、Cochrane library、SinoMed、中国知网、万方数据库2003—2020年6月公开发表的关于β-冠状病毒治疗措施的随机对照试验(RCT)、类试验和队列研究.双人独立筛选文献、提取资料,并对符合入选标准的文献采用Cochrane偏倚评价工具进行质量评价后,使用Stata 14.0版软件进行Meta分析.结
目的 对基于医院信息系统的真实世界研究进行主题分析,为未来基于医院信息系统开展相关研究提供借鉴和参考.方法 检索中国知网、万方数据知识服务平台、中国生物医学文献服务系统、维普中文期刊平台、PubMed数据库、EMBASE数据库,获取基于医院信息系统的真实世界研究.用VOS viewer 1.6.15版软件对纳入研究的关键词、作者、发表机构、发表期刊等字段进行提取,并生成高频关键词聚类网络图以及作者、机构的合作网络图.利用Microsoft Visio软件绘制研究内容思维导图.结果 367篇基于医院信息系统
背景与目的:同步放化疗是局部晚期鼻咽癌的首选治疗方法,但放化疗会使患者营养状况持续恶化,进而影响患者的生活质量及生存预后.探讨基于营养风险评估的个体化营养干预对局部晚期鼻咽癌同步放化疗患者生活质量及生存预后的影响.方法:选取2017年1月—2019年3月海南医学院第二附属医院耳鼻咽喉头颈外科收治的局部晚期鼻咽癌患者116例,随机分为干预组和对照组,每组58例,所有患者均接受同步放化疗,对照组放化疗期间行常规饮食指导,干预组患者根据营养风险评估行个体化营养干预.比较两组患者的营养状况变化、生活质量,并分析两