【摘 要】
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为建立一种快速且准确检测鸭源鹅细小病毒（D-GPV）的实时荧光定量PCR方法，本研究通过分析D-GPV基因序列的保守区设计并合成一对特异性引物，构建携带NS1基因的重组质粒作为标准品，绘制实时荧光定量PCR的标准曲线，并进行敏感性、特异性、重复性试验和临床样品的检测。结果显示，该方法标准曲线的的线性关系良好，相关系数为0.999；灵敏度高，检测底限为10拷贝；特异性与重复性好，与其他病毒无交叉反应
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为建立一种快速且准确检测鸭源鹅细小病毒（D-GPV）的实时荧光定量PCR方法，本研究通过分析D-GPV基因序列的保守区设计并合成一对特异性引物，构建携带NS1基因的重组质粒作为标准品，绘制实时荧光定量PCR的标准曲线，并进行敏感性、特异性、重复性试验和临床样品的检测。结果显示，该方法标准曲线的的线性关系良好，相关系数为0.999；灵敏度高，检测底限为10拷贝；特异性与重复性好，与其他病毒无交叉反应，批间和批内变异系数均低于1%。该方法对人工感染D-GPV鸭泄殖腔拭子和咽拭子样品的检测结果显示，鸭在攻毒后第1天即可以通过口腔和泄殖腔向外排毒，排毒量第3天达到高峰，排毒持续期可达到42 d。本研究所建立的荧光定量PCR方法灵敏度高、特异性和稳定性好，可用于临床样品中的D-GPV检测。
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