【摘 要】
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利用SMART (Switching Mechanism at 5'end of RNA Transcript)技术,以同源重组的方式构建了中国明对虾鳃细胞的全长cDNA文库.首先用RNA提取试剂盒从中国明对虾鳃细胞中
【机 构】
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中国水产科学研究院黄海水产研究所,中国水产科学研究院黄海水产研究所
【基金项目】
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国家重点基础研究发展计划(973计划)，国家自然科学基金，山东省青岛市自然科学基金，山东省自然科学基金，中国水产科学院科研项目
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利用SMART (Switching Mechanism at 5'end of RNA Transcript)技术,以同源重组的方式构建了中国明对虾鳃细胞的全长cDNA文库.首先用RNA提取试剂盒从中国明对虾鳃细胞中提取总RNA,以总RNA为模板,CDSⅢOligo(dT)为引物,反应一段时间后,再加入转换模板(Switching template),反转录合成cDNA第1链.在DNA聚合酶的作用下,通过长距离PCR,扩增双链DNA.双链cDNA经凝胶过滤柱纯化后,与线性化的pGADT7-Rec
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