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目的：建立土霉素片的含量测定方法。方法高效液相色谱法。采用Luna-C18色谱柱，以0.05 mol/L草酸铵溶液-二甲基甲酰胺-0.2 mol/L磷酸氢二铵（70∶25∶5）为流动相，用紫外检测器在282 nm波长处检测。结果土霉素片浓度在0.01～1 mg/mL范围内与峰面积线性关系良好（r＝0.9990），平均回收率为100.1%。结论高效液相色谱法快速、简便、准确，可用于土霉素片的含量测定。