【摘 要】
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目的 虽然大豆遗传转化取得了较大进展，但其转化效率仍然偏低。因此，有必要建立一个更加简单和高效的大豆转化系统。本研究的目的是以大豆成熟种子萌发产生的叶片（MSDL）为靶外植体，高频诱导和转化大豆体细胞胚（SE）。方法 将萌发7d的大豆幼苗上，摘取叶片并将其切成1.2cm×1.2cm的外植体。将叶片外植体置于胚胎诱导培养基（EIM）上诱导体细胞胚发生。将叶片外植体浸入携带pCAMBIA1301植物表
【机 构】
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青岛农业大学生命科学学院山东省高校植物生物技术重点实验室
【基金项目】
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山东省自然科学基金（ZR2019MC033）资助项目；
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目的 虽然大豆遗传转化取得了较大进展，但其转化效率仍然偏低。因此，有必要建立一个更加简单和高效的大豆转化系统。本研究的目的是以大豆成熟种子萌发产生的叶片（MSDL）为靶外植体，高频诱导和转化大豆体细胞胚（SE）。方法 将萌发7d的大豆幼苗上，摘取叶片并将其切成1.2cm×1.2cm的外植体。将叶片外植体置于胚胎诱导培养基（EIM）上诱导体细胞胚发生。将叶片外植体浸入携带pCAMBIA1301植物表达载体的农杆菌EHA105菌液进行遗传转化。结果 MSDL（包括初生叶和次生叶）均能被诱导产生SEs。大多数SE发生在叶片切口处。所试的不同基因型均能诱导SEs。SEs的最高诱导率为95.0%。GUS染色结果表明，平均转化效率达到75.4%。Southern杂交结果表明，目的基因稳定整合在大豆基因组中，拷贝数为1～3个。结论 本研究建立了以大豆MSDL为靶组织的体细胞胚高频诱导和遗传转化。该系统有望在大豆基因组编辑技术的开发上得到应用。
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