白细胞介素10基因克隆及其真核表达载体的构建与鉴定

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目的克隆人白细胞介素10(hIL-10)基因,以构建真核表达载体,并检测其在COS-7细胞中的表达情况。方法从人全血标本中提取细胞总RNA,以逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法扩增hIL-10基因,分别构建含hIL-10目的基因的克隆载体与表达载体,提取质粒,经酶切、PCR和DNA测序鉴定;重组表达载体pVAX1-hiL10转染COS-7细胞,观测hIL-10的瞬时表达情况。结果构建了重组克隆载体pMD18T-hiL10和真核表达载体pVAX1-hiL10,经酶切、PCR及测序鉴定正确,插入片段序列与G
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