【摘 要】
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目的:构建含人SALL4B基因的逆转录病毒载体并证明其在小鼠髓系祖细胞中的表达。方法:①用PCR方法从质粒pcDNA3-hSALL4B扩增包括有全部编码序列的人SALl4BcDNA,将其定向克隆至
【机 构】
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广州医学院第一附属医院肿瘤血液科,
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目的:构建含人SALL4B基因的逆转录病毒载体并证明其在小鼠髓系祖细胞中的表达。方法:①用PCR方法从质粒pcDNA3-hSALL4B扩增包括有全部编码序列的人SALl4BcDNA,将其定向克隆至逆转录病毒载体pLXSN,构建成含hSALL4的重组逆转录病毒载体;②将重组质粒在包装细胞系PT67中进行包装,用病毒上清感染32D细胞;③RT-PCR分析其mRNA表达;④Western blotting分析其蛋白质的表达。结果:①限制型内切酶酶切,PCR及DNA测序均证实hSALL4B成功地克隆入pLXSN;②转染的32D细胞在mRNA水平及蛋白水平均有SALL4B表达。结论:成功地构建了含人SALL4B的逆转录病毒表达载体;且表达于32D细胞中,为研究SALL4基因过表达对造血功能的作用及其机制奠定了基础。
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